Система Mizar TILT от Mizar Imaging - это модульная система для микроскопии плоскостного освещения, которая совместима практически с любым инвертированным микроскопом. Это позволяет Вам расширить возможности Вашей системы визуализации, просто добавив к ней Mizar TILT. Система от Mizar Imaging совместима с объективами как с большим, так и с малым увеличением, а также с масляными объективами с большой цифровой апертурой. Благодаря невероятно низкому уровню фототоксичности, TILT идеально подходит для долгосрочных экспериментов по визуализации живых организмов или отдельных клеток.
Система освещения Mizar TILT включает модуль освещения LITE и моторизованную подвижку X, Y, Z (пьезопривод), что позволяет быстро получать 3D-изображение с высоким разрешением на стандартном инвертированном микроскопе.
Особенности
- Минимальное фотообесцвечивание и фототоксичность;
- Совместимость с широким спектром типов образцов;
- Адаптируется к большинству инвертированных микроскопов;
- Не мешает проходящему свету и другим режимам освещения в микроскопе;
- Предназначена для работы с объективами как с высокой, так и с низкой числовой апертурой;
- Не требуется реконструкция изображения;
- Проста в использовании;
- Работает с любым одномодовым лазером;
- Совместима с любой камерой;
- Совместима с большинством пакетов ПО для систем визуализации;
- Опция: контроль температуры с помощью специальной камеры от OkoLabs. Доступны функции нагрева, охлаждения и контроля состава газовой среды.
Камера Okolab для контроля температуры и состава газовой среды
Принцип работы
Принцип, лежащий в основе TILT системы для микроскопии плоскостного освещения - это метод, известный как наклонное возбуждение боковой интерференции (Lateral Interference Tilted Excitation - LITE). В этом методе лазерный луч сначала коллимируется в радиально-симметричный луч диаметром 22 мм. Коллимированный свет затем пропускается через фотошаблон и цилиндрическую линзу, которая фокусирует свет в луч, имеющий приблизительно форму прямоугольной призмы. Цилиндрическая линза фокусирует луч вдоль одной оси, чтобы сформировать недифрагирующую плоскость освещения, которая затем наклоняется так, что нижняя часть луча параллельна фокальной плоскости объектива регистрации флуоресценции. Фотошаблон помещается перед цилиндрической линзой для создания интерференционной картины, которая удлиняет плоскость освещения. Метод LITE микроскопии устраняет пространственную интерференцию между объективами для освещения и регистрации флуоресценции, возникающую в обычных методах микроскопии плоскостного освещения, таким образом, делая его совместимым с любым объективом для регистрации флуоресценции, включая объективы с высокой числовой апертурой (NA 1.4 и выше).
Применения
- Визуализация фоточувствительных клеток и тканей;
- Биология развития (эмбриогенез и т. д.);
- Внутриклеточная динамика;
- Визуализация растений;
- Визуализация бактерий;
- Визуализация дрожжевых грибов;
- Долговременная визуализация живых клеток.
Совместимость с другими методами визуализации
Систему Tilt можно добавить практически к любому инвертированному микроскопу, не влияя на существующие возможности этого микроскопа. Таким образом, Tilt очень хорошо подходит для добавления второго способа визуализации к существующей системе визуализации. Например, систему Tilt можно установить на конфокальный микроскоп с вращающимся диском, TIRF, SIM микроскопы или конфокальный микроскоп с точечным сканированием. Кроме того, система Tilt для микроскопии плоскостного освещения позволяет выполнять ДИК и другие методы повышения контрастности в светлом поле отдельно от визуализации методом плоскостного освещения.
LITE microscopy: A technology for high numerical aperture, low photobleaching fluorescence imaging by Tanner C. Fadero et al..
Статья описывает новый метод световой флуоресцентной микроскопии LITE, который реализует система TILT.
Характеристики
Технические параметры системы Mizar Tilt:
Параметр
Значение
Плоскостное освещение
Толщина луча
4.3 мкм (FWHM)
Длина луча
300 мкм
Спектральный диапазон
400-700 нм
Моторизованная подвижка
XY подвижка
Шаговый двигатель с экнодерами
XY ход перемещения
25 мм х 50 мм
XY управление
Последовательный интерфейс, управление и/или джойстик
Z подвижка
Пьезо
Z ход перемещения
300 мкм
Z управление
Последовательный интерфейс, аналоговое напряжение или джойстик
Волоконный вход
Тип разъема
FC/APC или FC/PC
Часто задаваемые вопросы
Что такое система освещения Mizar TILT?
Mizar TILT - это система преобразования флуоресцентных микроскопов для проведения микроскопии плоскостного освещения. Она обеспечивает возможности освещения плоским лучом света и присущие ему преимущества (например, ограниченное фотоповреждение образца), а также преимущества эпифлуоресценции, такие как получение изображений с высоким разрешением. TILT система состоит из осветителя и моторизованного столика с энкодером для передвижения по осям X и Y и пьезоэлектронным управлением по оси Z.
Работает ли TILT точно так же, как другие методы плоскостного освещения?
Частично. Система Mizar TILT использует цилиндрическую линзу для создания плоского луча света из луча лазерного источника, подобно тому, как это делают некоторые другие методы микроскопии плоскостного освещения. Ключевым отличием является то, что TILT направляет плоский луч света под углом, чтобы сфокусировать самую тонкую часть плоского луча как можно ближе к линзе объектива. Это позволяет исследователю использовать объективы с высокой числовой апертурой и получать выгоды от эффективного захвата фотонов и максимального разрешения получаемого изображения.
TILT позволяет использовать объективы с высокой числовой апертурой. Почему это так важно?
Это позволяет более эффективно собирать свет и получать более высокое разрешение получаемого изображения. Хотя объективы с высокой числовой апертурой могут не подходить для всех приложений в микроскопии, они важны для других задач из-за упомянутых выше преимуществ. Несмотря на то, что получение более высокого разрешения является наградой само по себе, подумайте также о том, как более высокая эффективность захвата фотонов открывает новые возможности для экспериментов: повышенная эффективность регистрации фотонов не только подразумевает большую чувствительность при наблюдении за малораспространенными молекулами, она также подразумевает более слабое потенциально разрушающее воздействие. Из этого следует, что TILT может иметь даже меньший эффект фотоповреждения и фотообесцвечивания, чем другие методы плоскостного освещения, которые ограничены объективами с более низкой числовой апертурой, хотя Mizar Imaging не доказал это.
Включает ли TILT лазер? Какой тип лазера необходим для работы TILT?
У исследователей будут особые требования к лазеру, в зависимости от того, какие флуорофоры они используют. Поэтому не имеет смысла пытаться включить все лазеры с различными длинами волн, которые могут понадобиться исследователям. Мы можем поставить лазеры и лазерные объединители (комбайнеры) по мере необходимости. Mizar Imaging считает, что лазер мощностью 100 мВт (при мощности 50–75% от номинальной) удовлетворяет требования большинства, если не всех задач, и пользователь будет чувствовать себя комфортно, используя также лазер мощностью 50 мВт.
Кто разработал TILT?
Исследователь: Пол Мэддокс, основатель Mizar Imaging, в своей лаборатории в Университете Северной Каролины.
Как TILT позволяет получать изображения с высоким разрешением, а другие методы микроскопии плоскостного освещения - нет?
Ключ к преимуществу TILT находится в наклоне. Плоский луч света TILT входит под углом, так что самая узкая часть плоского луча существенно ближе к объективу. Благодаря этому пользователь может получать изображения с высокой числовой апертурой. Следовательно, исследователь может получать изображения с гораздо более высоким разрешением и гораздо большей чувствительностью обнаружения.
Легко ли использовать TILT?
Да. Как и любой точный исследовательский инструмент, например, сам микроскоп, TILT требует некоторого обучения и знания основополагающих принципов, чтобы функционировать оптимально, но легко Вам будет легко набрать опыт работы с ним – просто настраивая плоский луч во время получения изображения.
Требуется ли для полученных с TILT изображений вычислительная обработка после получения изображений?
Нет. Вы можете получить красивые естественные изображения и последовательности изображений (например, фильмы), и Вам не потребуется специальная вычислительная обработка, чтобы определить, что у Вас получилось. Вы можете сразу же понять, насколько получившиеся изображения хороши и достойны публикации.
Плоский луч TILT работает под углом. Что это за угол?
Mizar Imaging считает, что лучше всего подходит угол от 2.5 ° до 4.5 °. Угол легко отрегулировать, и разные углы могут лучше работать для разных видов биологических образцов. Немного попрактиковавшись, можно научиться фокусировать световую плоскость и экспериментировать под разными углами в соответствии со своими потребностями. Как правило, слишком малый угол может привести к «затемнению», а слишком крутой угол может привести к попаданию рассеянного света в линзу объектива.
Большие углы падения светового плоского луча TILT вызывают артефакты?
Большие углы могут вызывать эффект рассеяния света под широким углом, когда свет возбуждения попадает в объектив, но это можно устранить с помощью соответствующих эмиссионных оптических фильтров.
Вызывает ли TILT артефакты затенения, как это видно на других методах плоскостного освещения?
Затенение может быть проблемой при малых углах падения, но регулировка TILT таким образом, чтобы световой луч имел немного большие углы падения, может улучшить и даже устранить этот эффект. Как и в других методах визуализации, многое зависит от параметров визуализации образца и подготовки образца.
Вызывает ли TILT фотоповреждение / фотообесцвечивание / фототоксичность?
TILT находится на ранних стадиях производства. Компания будет держать исследователей в курсе измеренных пределов при тестировании прибора. Mizar Imaging так же заинтересована, как и исследователи, в том, чтобы увидеть, насколько расширяет возможности проведения длительных экспериментов с высокочастотной выборкой, чтобы получить лучшее временное разрешение. Компания также будет тестировать границы фотообесцвечивания и держать своих пользователей в курсе, поскольку она достигает новых этапов развития прибора, и рекомендует исследователям проверять наличие обновлений.
Каковы крайние значения фотоповреждений и обесцвечивания, которые Mizar Imaging проверил?
На момент написания этой статьи компания получила изображения клеточных культур при непрерывном освещении в течение 24 часов, не видя эффектов повреждения, однако тестируемые образцы варьируются, и тестируемые границы меняются слишком быстро, чтобы постоянно обновлять информацию. Компания будет постоянно добавлять посты в своем Твиттере, так как она и другие пользователи изучают новые возможности в использовании плоскостного освещения, предоставляемого TILT.
Могу ли я использовать TILT с моими существующими микроскопами?
Да. Если Вы используете микроскоп какой-либо крупной компании по производству микроскопов (Zeiss, Leica Microsystems, Nikon Instruments, Olympus), то TILT подойдет к ней без дальнейших модификаций. Если по какой-то непредвиденной причине он не подходит, Mizar Imaging изменит столик TILT, чтобы он соответствовал Вашему микроскопу.
Могу ли я визуализировать живые клетки или провести высокочастотную визуализацию с помощью TILT?
Да, конечно. TILT оптимизирован для визуализации живых клеток. Цели исследования часто требуют выборки с высоким временным разрешением. Вы можете использовать TILT для высокочастотной выборки и даже для непрерывного освещения/выборки без фотоповреждений.
С какими флуорофорами работает TILT?
Со всеми. Если у Вас есть источник возбуждающего света и соответствующие оптические фильтры возбуждения, то TILT должен быть в состоянии создать луч плоскостного освещения для Ваших целей.
Какое поле зрения может захватить TILT?
Сам световой луч TILT не ограничивает доступное поле зрения. Это будет зависеть от объектива, который Вы решите использовать.
Товар бывает в наличии на нашем складе в РФ крайне редко. Из-за высокой стоимости и специфических характеристик высокотехнологического оборудования в большинстве случаев оно отсутствует и на складе самого производителя, так как производится под конкретный заказ.
Недорогие расходные материалы и дополнительные комплектующие, пользующиеся популярностью, производятся в значительном количестве и могут быть отправлены нам нашими поставщиками в течение пары дней после получения оплаты по инвойсу.
1. Наличие товара на складе производителя и срок его производства;
Если товара нет на складе производителя, срок производства высокотехнологичного оборудования, как правило, составляет от трех до шести недель. Производство сложных комплексных систем может занимать больше времени.
2. Время на доставку груза в РФ;
Срок доставки груза в РФ зависит от его веса и габаритов. Если груз небольшой, то он летит самолетом, что занимает один-три дня до таможенного склада. Если вес груза измеряется сотнями килограммов, то он плывет кораблем в пределах месяца.
3. Срок прохождения таможенного контроля.
Данный этап занимает до 10 дней. В случае непредвиденных обстоятельств процесс таможенного оформления может затянутся на месяц и больше.
Срок поставки комплектующих Thorlabs занимает от 4 недель.
В этой статье рассмотрены основы флуоресцентной микроскопии плоскостного освещения (включая краткую историю), обсуждаются различные варианты ее реализации и применений, а также представлены основные аспекты подготовки образца для данного метода микроскопии.