Динамическое культивирование клеток
|
Динамическое культивирование клеток - культивирование клеток in vitro в присутствии приложенного механического напряжения. Большой интерес представляет возможность контролировать поток жидкости, например, среды, над клетками во время их роста. Скорость потока может быть задана очень точно с помощью микрофлюидных инструментов, что является идеальным способом для лучшего воспроизведения динамической среды, в которой обычно находятся клетки. Микрофлюидная перфузия среды имитирует поток крови, обеспечивая обмен питательными веществами и удаление отработанных продуктов, а также создает напряжение сдвига для клеток. Подробнее о динамическом культивировании клеток Вы можете узнать из вебинара от эксперта Elveflow Лизы Муйжниекс. |
Вебинар Elveflow: Культивирование клеток в динамических условиях
Преимущества динамического культивирования
В этом руководстве описывается перфузия для динамического культивирования. Создавайте перфузию клеток с помощью автоматического контроллера давления OB1 Elveflow, используя различные профили потока, включая постоянный поток или прерывистый, постоянную скорость или пульсацию, или создайте индивидуальный профиль, например, для имитации сердечного ритма. Читайте также наши заметки об автоматизации посева клеток и окрашивания клеток для динамического культивирования клеток.
Некоторые основные области применения динамического культивирования клеток включают:
- Визуализация живых клеток (например, визуализация кальция, FISH);
- Скрининг лекарственных препаратов;
- Работа с напряжением сдвига;
- Анализ адгезии клеток: иммунный ответ, раковая инвазия и метастазирование;
- Модели физиологии и заболеваний: Органы на чипе, формирование и окклюзия кровеносных сосудов (атеросклероз), гомеостаз костной ткани и заболевания (остеопороз) и т.д.
Компоненты систем для автоматизированного посева клеток
Комплектующие набора Elveflow
Система распределения жидкости | ||
Схема установки для автоматизированного посева клеток
Оборудование
|
Реактивы
|
Протокол для перфузии клеток
- Следуйте нашему руководству по засеиванию и адгезии клеток в микрофлюидном чипе.
- Перфузия: переключите поток на резервуар, содержащий среду 1.
- Переключение среды: при желании переключите поток на резервуар, содержащий среду 2.
Совет: чтобы обеспечить надежное прикрепление, оставьте клетки на 12-18 часов после посева перед запуском потока.
Совет: используйте ступенчатый градиент для медленного увеличения скорости потока до желаемой при планировании непрерывной перфузии
Профили потока могут быть постоянными, пульсирующими или индивидуальными, например, имитировать сердечный ритм. |
ПО Elveflow для управления установкой |
Результаты
Прикрепление и пролиферация клеток HeLa (t=2ч, 18ч, 26ч). Перфузия (прерывистая со скоростью 20 мкл/мин в течение 10 мин в час) была начата при t=18ч.