Количественная оценка разрешающей способности системы трехмерной локализационной микроскопии Leica SR GSD 3D с использованием двумерных и трехмерных маркеров-нанолинеек - azimp-micro.ru
azimp-micro.ru
Ваш ориентир в Микроскопии
Ru En
8 (800) 551-20-97
+7 (495) 792-39-88
+7 (812) 407-10-47
Пн. – Пт.: с 9:30 до 18:00
Заказать звонок
Москва, Шаболовка, 10
info@azimp-micro.ru
Компания
  • О компании
  • Поставщики
  • Вакансии
  • Клиенты
Каталог
  • Микроскопы
    Микроскопы
    • Новые микроскопы
    • Б. у. микроскопы
    • Портативные микроскопы
    • Модульные микроскопы
    • Специализированные микроскопы
    • Делители изображений
  • Системы визуализации
    Системы визуализации
    • Конфокальные микроскопы
    • Мультифотонные микроскопы
    • Модульные микроскопы
    • Гиперспектральные микроскопы
    • Микроскопы сверхвысокого разрешения
    • Контроль качества
    • Микроскопы для живых клеток
    • Микроскопы для СИПМ
    • Микроскопы с плоскостным освещением
    • Рамановские микроскопы
    • Сканеры микропрепаратов
    • Системы для ОКТ
    • Ещё
  • Модификация микроскопов
    Модификация микроскопов
    • 3D микроскопия
    • FLIM микроскопия
    • STED микроскопия
    • Конфокальная микроскопия
    • Микроскопия плоскостного освещения
    • Системы локализованного освещения
    • Автоматизация микроскопа
  • Аксессуары для микроскопов
    Аксессуары для микроскопов
    • Столики для микроскопов
    • Моторизация микроскопа
    • Микроскопия живых клеток
    • Оборудование для ИКСИ
    • Адаптеры для микроскопов
    • Делители изображений
    • Колеса для фильтров
    • Объективы для микроскопов
    • Расходные материалы
    • Контроль качества
  • Товары в наличии
    Товары в наличии
    • Склад в Москве
    • Быстрая доставка
  • Микрофлюидика
    Микрофлюидика
    • Системы управления потоком
    • Микроскопы
    • Системы измерения
    • Дополнительное оборудование
    • Готовые наборы
    • Контроль температуры
    • Оборудование для инжекции
    • Микрофлюидные чипы
    • 3D биопринтеры
    • Программное обеспечение
  • Электрофизиология
    Электрофизиология
    • Готовые системы
    • Манипуляторы
    • Оборудование для микроинъекций
    • Оборудование для патч-кламп
    • Пуллеры и микрокузницы
    • Системы визуализации
    • Системы сбора и обработки данных
    • Системы усиления
    • Стимуляторы
    • Физиология мышц
    • Электроды
    • Комплектующие
    • Ещё
  • Исследования на животных
    Исследования на животных
    • In vivo визуализация и стимуляция
    • Структурированное освещение
    • Анестезия животных
    • Нейрофизиология
    • Оборудование для стереотаксиса
    • Хирургические инструменты
    • Комплектующие
  • Лабораторные принадлежности
    Лабораторные принадлежности
    • Чашки Петри
    • Слайд-камеры
    • Посуда с биоинертной поверхностью
    • Съемные силиконовые лунки
    • Культуральные вставки
    • Многолуночные планшеты
    • Посуда с сеткой на дне
    • Предметные и покровные стекла
    • Программное обеспечение
  • Аналитическое оборудование
    Аналитическое оборудование
    • Для изучения биологических объектов и сред
    • Для молекулярной и клеточной биологии
    • Пробоподготовка
    • Спектроскопия
    • Фотохимия
    • Анализ свободных радикалов
    • Пассивная дозиметрия
    • Диагностическое оборудование
  • FLIM микроскопия
    FLIM микроскопия
    • TCSPC модули
    • FLIM системы
    • Детекторы счета фотонов
    • Пикосекундные лазеры
    • Программное обеспечение
  • Источники излучения
    Источники излучения
    • Многоволновые лазеры
    • Пикосекундные лазеры
    • Фемтосекундные лазеры
    • Ламповые источники
    • Светодиодные источники
    • Системы локализованного освещения
    • Жидкостные световоды и аксессуары
  • Научные камеры
    Научные камеры
    • CCD камеры
    • EMCCD камеры
    • HDMI камеры
    • sCMOS камеры
    • CMOS камеры
    • Делители изображений
  • Реагенты и реактивы
    Реагенты и реактивы
    • Красители для STED
    • Мечение и зонды
  • Каталог Edmund Optics
    Каталог Edmund Optics
    • Микроскопы
    • Объективы для микроскопов
    • Фильтры для микроскопии
    • Оптомеханика
    • Оптика для передачи изображения
    • Тест-объекты для микроскопов
    • Камеры
    • Окуляры
    • Увеличительные стекла
Основы микроскопии
  • Конфокальная микроскопия
    • Лазерная сканирующая микроскопия
    • Основные принципы метода
  • Мультифотонная микроскопия
    • Основы мультифотонной микроскопии
    • Лазерная сканирующая микроскопия
  • Общие принципы
    • Основные характеристики и маркировка объективов
    • Освещение по Келеру
    • Влияние конденсора микроскопа на разрешение изображения
    • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
  • Флуоресцентная микроскопия
    • Микроскопия плоскостного освещения
    • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
  • Электрофизиология
    • Приборы и методы
    • Патч-кламп
  • Оптогенетика
    • Оптогенетическая стимуляция
    • Кальциевая визуализация in vivo
Проекты
  • Микроскопия
  • Оптогенетика
  • Спектроскопия
Вебинары
  • Вебинары Abberior Instruments
    • STED микроскопия живых клеток
    • STED PAINT микроскопия
    • Адаптивная оптика в STED микроскопии
    • "Микроскоп MINFLUX - революция в флуоресцентной микроскопии" - вебинар Нобелевского лауреата
    • Демонстрация и принцип работы модуля STEDYCON
  • Вебинары Andor
    • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 2
    • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 1
    • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах sCMOS
    • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах EMCCD
    • Чувствительность sCMOS камер Andor с задней подсветкой для микроскопии
  • Вебинары Becker&Hickl
    • Метаболическая визуализация: одновременная регистрация FLIM изображений NAD(P)H и FAD
    • Оптимизация визуализации, аппроксамация и анализ автофлуоресцентных NAD(P)H и FAD
    • Исследование метаболизма в живых клетках рака предстательной железы: двухфотонная FLIRR микроскопия
    • Руководство для чайников по FLIM / FRET
    • Отслеживание концентрации кислорода методом гашения фосфоренценции
    • ПО SPCImage NG: извлечение информации из FLIM данных
  • Вебинары Confocal.nl
    • Микроскопия сверхвысокого разрешения при слабой мощности излучения
    • Принцип работы оптического модуля RCM для конфокальной микроскопии
    • Преодоление ограничений оптической микроскопии с помощью модуля RCM
    • Визуализация живых клеток с помощью инкубаторов Tokai Hit и модуля RCM
    • Оптический модуль RCM для конфокальной микроскопии и ПО Volocity
    • Получение разрешения 120 нм на RCM с ПО Microvolution
    • Детекторы совместимые с RCM модулем для конфокальной микроскопии
  • Вебинары Double Helix Optics
    • Технология фазовых масок Double Helix для исследования полимерных структур
    • Обзор технологии 3D визуализации Double Helix
    • Отслеживание траекторий одиночных молекул в 3D с помощью технологии Double Helix
  • Вебинары Elveflow
    • Как собрать набор для рециркуляции от Elveflow?
    • Поток и рециркуляция среды в культуре клеток на микрофлюидном чипе
  • Вебинары Femtonics
    • Новейшие разработки в области нейробиологии и многофотонной визуализации
    • Настройтесь на мозг — многофотонная микроскопия
    • Atlas для мозга: двухфотонная флуоресцентная микроскопия
  • Вебинары Molecular Devices
    • Использование электрофизиологических исследований для изучения работы мозга
    • Пакетный анализ данных с помощью новой функции ПО Axon pCLAMP 11
  • Вебинары Thorlabs
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 4
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 3
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 2
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 1
    • Как выбрать лазерный источник и оптику для мультифотонного микроскопа
    • Как правильно подобрать камеру для микроскопа
Условия работы
  • Оформление заказа
  • Оплата заказа
  • Доставка
  • Наши преимущества
  • Услуги
Информация
  • Новости
  • Статьи
  • Вопрос ответ
  • Обзоры
  • Мероприятия
Контакты
    azimp-micro.ru
    Компания
    • О компании
    • Поставщики
    • Вакансии
    • Клиенты
    Каталог
    • Микроскопы
      Микроскопы
      • Новые микроскопы
      • Б. у. микроскопы
      • Портативные микроскопы
      • Модульные микроскопы
      • Специализированные микроскопы
      • Делители изображений
    • Системы визуализации
      Системы визуализации
      • Конфокальные микроскопы
      • Мультифотонные микроскопы
      • Модульные микроскопы
      • Гиперспектральные микроскопы
      • Микроскопы сверхвысокого разрешения
      • Контроль качества
      • Микроскопы для живых клеток
      • Микроскопы для СИПМ
      • Микроскопы с плоскостным освещением
      • Рамановские микроскопы
      • Сканеры микропрепаратов
      • Системы для ОКТ
      • Ещё
    • Модификация микроскопов
      Модификация микроскопов
      • 3D микроскопия
      • FLIM микроскопия
      • STED микроскопия
      • Конфокальная микроскопия
      • Микроскопия плоскостного освещения
      • Системы локализованного освещения
      • Автоматизация микроскопа
    • Аксессуары для микроскопов
      Аксессуары для микроскопов
      • Столики для микроскопов
      • Моторизация микроскопа
      • Микроскопия живых клеток
      • Оборудование для ИКСИ
      • Адаптеры для микроскопов
      • Делители изображений
      • Колеса для фильтров
      • Объективы для микроскопов
      • Расходные материалы
      • Контроль качества
    • Товары в наличии
      Товары в наличии
      • Склад в Москве
      • Быстрая доставка
    • Микрофлюидика
      Микрофлюидика
      • Системы управления потоком
      • Микроскопы
      • Системы измерения
      • Дополнительное оборудование
      • Готовые наборы
      • Контроль температуры
      • Оборудование для инжекции
      • Микрофлюидные чипы
      • 3D биопринтеры
      • Программное обеспечение
    • Электрофизиология
      Электрофизиология
      • Готовые системы
      • Манипуляторы
      • Оборудование для микроинъекций
      • Оборудование для патч-кламп
      • Пуллеры и микрокузницы
      • Системы визуализации
      • Системы сбора и обработки данных
      • Системы усиления
      • Стимуляторы
      • Физиология мышц
      • Электроды
      • Комплектующие
      • Ещё
    • Исследования на животных
      Исследования на животных
      • In vivo визуализация и стимуляция
      • Структурированное освещение
      • Анестезия животных
      • Нейрофизиология
      • Оборудование для стереотаксиса
      • Хирургические инструменты
      • Комплектующие
    • Лабораторные принадлежности
      Лабораторные принадлежности
      • Чашки Петри
      • Слайд-камеры
      • Посуда с биоинертной поверхностью
      • Съемные силиконовые лунки
      • Культуральные вставки
      • Многолуночные планшеты
      • Посуда с сеткой на дне
      • Предметные и покровные стекла
      • Программное обеспечение
    • Аналитическое оборудование
      Аналитическое оборудование
      • Для изучения биологических объектов и сред
      • Для молекулярной и клеточной биологии
      • Пробоподготовка
      • Спектроскопия
      • Фотохимия
      • Анализ свободных радикалов
      • Пассивная дозиметрия
      • Диагностическое оборудование
    • FLIM микроскопия
      FLIM микроскопия
      • TCSPC модули
      • FLIM системы
      • Детекторы счета фотонов
      • Пикосекундные лазеры
      • Программное обеспечение
    • Источники излучения
      Источники излучения
      • Многоволновые лазеры
      • Пикосекундные лазеры
      • Фемтосекундные лазеры
      • Ламповые источники
      • Светодиодные источники
      • Системы локализованного освещения
      • Жидкостные световоды и аксессуары
    • Научные камеры
      Научные камеры
      • CCD камеры
      • EMCCD камеры
      • HDMI камеры
      • sCMOS камеры
      • CMOS камеры
      • Делители изображений
    • Реагенты и реактивы
      Реагенты и реактивы
      • Красители для STED
      • Мечение и зонды
    • Каталог Edmund Optics
      Каталог Edmund Optics
      • Микроскопы
      • Объективы для микроскопов
      • Фильтры для микроскопии
      • Оптомеханика
      • Оптика для передачи изображения
      • Тест-объекты для микроскопов
      • Камеры
      • Окуляры
      • Увеличительные стекла
    Основы микроскопии
    • Конфокальная микроскопия
      • Лазерная сканирующая микроскопия
      • Основные принципы метода
    • Мультифотонная микроскопия
      • Основы мультифотонной микроскопии
      • Лазерная сканирующая микроскопия
    • Общие принципы
      • Основные характеристики и маркировка объективов
      • Освещение по Келеру
      • Влияние конденсора микроскопа на разрешение изображения
      • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
    • Флуоресцентная микроскопия
      • Микроскопия плоскостного освещения
      • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
    • Электрофизиология
      • Приборы и методы
      • Патч-кламп
    • Оптогенетика
      • Оптогенетическая стимуляция
      • Кальциевая визуализация in vivo
    Проекты
    • Микроскопия
    • Оптогенетика
    • Спектроскопия
    Вебинары
    • Вебинары Abberior Instruments
      • STED микроскопия живых клеток
      • STED PAINT микроскопия
      • Адаптивная оптика в STED микроскопии
      • "Микроскоп MINFLUX - революция в флуоресцентной микроскопии" - вебинар Нобелевского лауреата
      • Демонстрация и принцип работы модуля STEDYCON
    • Вебинары Andor
      • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 2
      • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 1
      • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах sCMOS
      • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах EMCCD
      • Чувствительность sCMOS камер Andor с задней подсветкой для микроскопии
    • Вебинары Becker&Hickl
      • Метаболическая визуализация: одновременная регистрация FLIM изображений NAD(P)H и FAD
      • Оптимизация визуализации, аппроксамация и анализ автофлуоресцентных NAD(P)H и FAD
      • Исследование метаболизма в живых клетках рака предстательной железы: двухфотонная FLIRR микроскопия
      • Руководство для чайников по FLIM / FRET
      • Отслеживание концентрации кислорода методом гашения фосфоренценции
      • ПО SPCImage NG: извлечение информации из FLIM данных
    • Вебинары Confocal.nl
      • Микроскопия сверхвысокого разрешения при слабой мощности излучения
      • Принцип работы оптического модуля RCM для конфокальной микроскопии
      • Преодоление ограничений оптической микроскопии с помощью модуля RCM
      • Визуализация живых клеток с помощью инкубаторов Tokai Hit и модуля RCM
      • Оптический модуль RCM для конфокальной микроскопии и ПО Volocity
      • Получение разрешения 120 нм на RCM с ПО Microvolution
      • Детекторы совместимые с RCM модулем для конфокальной микроскопии
    • Вебинары Double Helix Optics
      • Технология фазовых масок Double Helix для исследования полимерных структур
      • Обзор технологии 3D визуализации Double Helix
      • Отслеживание траекторий одиночных молекул в 3D с помощью технологии Double Helix
    • Вебинары Elveflow
      • Как собрать набор для рециркуляции от Elveflow?
      • Поток и рециркуляция среды в культуре клеток на микрофлюидном чипе
    • Вебинары Femtonics
      • Новейшие разработки в области нейробиологии и многофотонной визуализации
      • Настройтесь на мозг — многофотонная микроскопия
      • Atlas для мозга: двухфотонная флуоресцентная микроскопия
    • Вебинары Molecular Devices
      • Использование электрофизиологических исследований для изучения работы мозга
      • Пакетный анализ данных с помощью новой функции ПО Axon pCLAMP 11
    • Вебинары Thorlabs
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 4
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 3
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 2
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 1
      • Как выбрать лазерный источник и оптику для мультифотонного микроскопа
      • Как правильно подобрать камеру для микроскопа
    Условия работы
    • Оформление заказа
    • Оплата заказа
    • Доставка
    • Наши преимущества
    • Услуги
    Информация
    • Новости
    • Статьи
    • Вопрос ответ
    • Обзоры
    • Мероприятия
    Контакты
      azimp-micro.ru
      0
      • Компания
        • Назад
        • Компания
        • О компании
        • Поставщики
        • Вакансии
        • Клиенты
      • Каталог
        • Назад
        • Каталог
        • Микроскопы
          • Назад
          • Микроскопы
          • Новые микроскопы
            • Назад
            • Новые микроскопы
            • Биологические микроскопы
            • Флуоресцентные микроскопы
            • Аксессуары для микроскопов
            • Стереомикроскопы
            • Поляризационные микроскопы
            • Металлографические и промышленные микроскопы
          • Б. у. микроскопы
            • Назад
            • Б. у. микроскопы
            • Б. у. микроскопы Leica
            • Б. у. микроскопы Nikon
            • Б. у. микроскопы Olympus
            • Б. у. микроскопы Zeiss
            • Б. у. объективы
          • Портативные микроскопы
          • Модульные микроскопы
          • Специализированные микроскопы
          • Делители изображений
        • Системы визуализации
          • Назад
          • Системы визуализации
          • Конфокальные микроскопы
          • Мультифотонные микроскопы
          • Модульные микроскопы
          • Гиперспектральные микроскопы
          • Микроскопы сверхвысокого разрешения
            • Назад
            • Микроскопы сверхвысокого разрешения
            • Микроскопы
            • Дополнительные модули
          • Контроль качества
          • Микроскопы для живых клеток
          • Микроскопы для СИПМ
          • Микроскопы с плоскостным освещением
          • Рамановские микроскопы
          • Сканеры микропрепаратов
          • Системы для ОКТ
        • Модификация микроскопов
          • Назад
          • Модификация микроскопов
          • 3D микроскопия
          • FLIM микроскопия
          • STED микроскопия
          • Конфокальная микроскопия
            • Назад
            • Конфокальная микроскопия
            • Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия
            • Конфокальная микроскопия с вращающимся диском
          • Микроскопия плоскостного освещения
          • Системы локализованного освещения
          • Автоматизация микроскопа
        • Аксессуары для микроскопов
          • Назад
          • Аксессуары для микроскопов
          • Столики для микроскопов
            • Назад
            • Столики для микроскопов
            • Моторизированные столики
            • Столики с нагревом и охлаждением
          • Моторизация микроскопа
            • Назад
            • Моторизация микроскопа
            • Моторизированные столики
            • Системы фокусировки
            • Системы загрузки предметных стекол
            • Джойстики
            • Контроллеры
            • Система автоматизации микроскопа
          • Микроскопия живых клеток
            • Назад
            • Микроскопия живых клеток
            • Нагревательные столики
            • Инкубаторы
            • Газовые контроллеры
            • Оборудование для ИКСИ
            • Системы для перфузии
          • Оборудование для ИКСИ
          • Адаптеры для микроскопов
          • Делители изображений
          • Колеса для фильтров
          • Объективы для микроскопов
          • Расходные материалы
            • Назад
            • Расходные материалы
            • Стекла для микроскопа
            • Флуоресцентные красители
            • Наборы для калибровки
          • Контроль качества
            • Назад
            • Контроль качества
            • Предметные стекла Abberior
            • Предметные стекла Argolight
            • Флуоресцентные тестеры GATTAquant
        • Товары в наличии
          • Назад
          • Товары в наличии
          • Склад в Москве
          • Быстрая доставка
        • Микрофлюидика
          • Назад
          • Микрофлюидика
          • Системы управления потоком
          • Микроскопы
          • Системы измерения
          • Дополнительное оборудование
            • Назад
            • Дополнительное оборудование
            • Коннекторы и адаптеры
            • Трубки
          • Готовые наборы
          • Контроль температуры
          • Оборудование для инжекции
            • Назад
            • Оборудование для инжекции
            • Готовые системы
            • Микронасосы
            • Шприцевые насосы
            • Перистальтические насосы
          • Микрофлюидные чипы
            • Назад
            • Микрофлюидные чипы
            • Микрофлюидные чипы из полимеров
            • Микрофлюидные чипы из стекла
            • Органы на чипах
            • Изготовление чипов
          • 3D биопринтеры
            • Назад
            • 3D биопринтеры
            • 3D биопринтеры
            • Компоненты для биопечати
          • Программное обеспечение
        • Электрофизиология
          • Назад
          • Электрофизиология
          • Готовые системы
          • Манипуляторы
          • Оборудование для микроинъекций
          • Оборудование для патч-кламп
            • Назад
            • Оборудование для патч-кламп
            • Автоматизированные системы
            • Системы на искусственных мембpанах
            • Усилители для patch-clamp
          • Пуллеры и микрокузницы
          • Системы визуализации
            • Назад
            • Системы визуализации
            • Источники света
            • Микроскопы
            • Системы контроля освещения
          • Системы сбора и обработки данных
          • Системы усиления
          • Стимуляторы
          • Физиология мышц
          • Электроды
            • Назад
            • Электроды
            • Кремниевые зонды
            • Массивы микроэлектродов
            • Металлические электроды
            • Разъемы с электродами
            • Электроды для периферических нервов
          • Комплектующие
            • Назад
            • Комплектующие
            • Источники света и контроллеры
            • Оптические разветвители
            • Камера
            • Вращающиеся соединения
            • Волоконная фотометрия
            • Канюли
            • Миниатюрные микроскопы
            • Патч-корды
            • Столы и стойки
            • Электрофизиология
            • Аксессуары
        • Исследования на животных
          • Назад
          • Исследования на животных
          • In vivo визуализация и стимуляция
          • Структурированное освещение
          • Анестезия животных
            • Назад
            • Анестезия животных
            • Многофункциональные решения
            • Аппараты для анестезии
            • Аппараты ИВЛ
            • Аксессуары
            • Системы мониторинга
          • Нейрофизиология
          • Оборудование для стереотаксиса
            • Назад
            • Оборудование для стереотаксиса
            • Стереотаксис крыс
            • Стереотаксис мышей
            • Стереотаксис мышей и крыс
            • Стереотаксис крупных животных
            • Оборудование для микроинъекций
            • Аксессуары для систем стереотаксиса
          • Хирургические инструменты
            • Назад
            • Хирургические инструменты
            • Хирургические наборы для небольших животных
            • Наборы для ветеринарии
          • Комплектующие
            • Назад
            • Комплектующие
            • Источники света и контроллеры
            • Оптические разветвители
            • Камера
            • Вращающиеся соединения
            • Волоконная фотометрия
            • Канюли
            • Миниатюрные микроскопы
            • Оптогенетика
            • Патч-корды
            • Электрофизиология
            • Аксессуары
        • Лабораторные принадлежности
          • Назад
          • Лабораторные принадлежности
          • Чашки Петри
          • Слайд-камеры
            • Назад
            • Слайд-камеры
            • Камеры на покровных стеклах
            • Камеры на предметных стеклах
            • Слайд-камеры с каналами
            • Слайд-камеры с клейким основанием
            • Со структурированной поверхностью
            • Аксессуары для слайд-камер
          • Посуда с биоинертной поверхностью
          • Съемные силиконовые лунки
          • Культуральные вставки
          • Многолуночные планшеты
          • Посуда с сеткой на дне
          • Предметные и покровные стекла
          • Программное обеспечение
        • Аналитическое оборудование
          • Назад
          • Аналитическое оборудование
          • Для изучения биологических объектов и сред
            • Назад
            • Для изучения биологических объектов и сред
            • Изучение газообмена
            • Изучение фотосинтеза
            • Камеры Шоландера
            • Контроль качества продуктов
            • Системы контроля среды
            • Системы фенотипирования
            • Электрохимический анализ
            • Изучение корней
          • Для молекулярной и клеточной биологии
            • Назад
            • Для молекулярной и клеточной биологии
            • Оборудование для работы с клетками
            • Цифровые сканеры микропрепаратов
            • Считыватели и промыватели микропланшетов
            • Микроскопы для клеток
            • Счетчики клеток
            • Холодильное оборудование
            • Гомогенизаторы высокого давления
            • Спектрофотометры
          • Пробоподготовка
            • Назад
            • Пробоподготовка
            • Вискозиметры
            • Материаловедение
            • Микротомы
            • Системы упаривания
            • Электронная микроскопия
          • Спектроскопия
          • Фотохимия
          • Анализ свободных радикалов
            • Назад
            • Анализ свободных радикалов
            • Анализаторы
            • Биосенсоры
          • Пассивная дозиметрия
          • Диагностическое оборудование
            • Назад
            • Диагностическое оборудование
            • Аксессуары
            • Измерительные инструменты
            • лабораторное оборудование
            • Лабораторные остатки
            • Материальное тестирование
        • FLIM микроскопия
          • Назад
          • FLIM микроскопия
          • TCSPC модули
            • Назад
            • TCSPC модули
            • TCSPC платы
            • Автономные TCSPC системы
          • FLIM системы
          • Детекторы счета фотонов
          • Пикосекундные лазеры
          • Программное обеспечение
        • Источники излучения
          • Назад
          • Источники излучения
          • Многоволновые лазеры
          • Пикосекундные лазеры
          • Фемтосекундные лазеры
          • Ламповые источники
          • Светодиодные источники
            • Назад
            • Светодиодные источники
            • Светодиодные источники CoolLED
            • Светодиодные источники Excelitas
            • Светодиодные источники YODN
            • Светодиодные источники MShot
            • Встраиваемые осветители
            • Специализированные светодиоды
          • Системы локализованного освещения
          • Жидкостные световоды и аксессуары
        • Научные камеры
          • Назад
          • Научные камеры
          • CCD камеры
            • Назад
            • CCD камеры
            • CCD камеры Andor
            • CCD камеры Lumenera
            • CCD камеры Photometrics
          • EMCCD камеры
          • HDMI камеры
          • sCMOS камеры
            • Назад
            • sCMOS камеры
            • sCMOS камеры Andor
            • sCMOS камеры Hamamatsu
            • sCMOS камеры MShot
            • sCMOS камеры Photometrics
            • sCMOS камеры Tucsen
          • CMOS камеры
            • Назад
            • CMOS камеры
            • CMOS камеры Lumenera
            • CMOS камеры MShot
            • CMOS камеры Thorlabs
            • CMOS камеры Tucsen
          • Делители изображений
        • Реагенты и реактивы
          • Назад
          • Реагенты и реактивы
          • Красители для STED
            • Назад
            • Красители для STED
            • Флуоресцентные красители CAGE
            • Флуоресцентные красители LIVE
            • Флуоресцентные красители STAR
            • Флуоресцентные красители FLIP
            • Флуоресцентные красители FLUX
          • Мечение и зонды
            • Назад
            • Мечение и зонды
            • Мечение ДНК/кДНК
            • Мечение РНК/кРНК
        • Каталог Edmund Optics
          • Назад
          • Каталог Edmund Optics
          • Микроскопы
            • Назад
            • Микроскопы
            • Инвертированные и стереомикроскопы
            • Компактные и прямые микроскопы
            • Микроскопы Mitutoyo
            • Микроскопы Olympus
          • Объективы для микроскопов
            • Назад
            • Объективы для микроскопов
            • Объективы Mitutoyo
            • Объективы Nikon
            • Объективы Olympus
            • Объективы TECHSPEC®
            • Отражающие объективы
            • Модульные Zoom системы
            • Объективы с конечным задним фокусным расстоянием
            • Объективы с коррекцией на бесконечность
          • Фильтры для микроскопии
            • Назад
            • Фильтры для микроскопии
            • Коротковолновые фильтры
            • Нейтральные фильтры
            • Полосовые фильтры
            • Флуоресцентные фильтры
            • Длинноволновые и дихроичные фильтры
            • Колеса фильтров, фильтры в кубе
          • Оптомеханика
            • Назад
            • Оптомеханика
            • Держатели оптики
            • Оптические столы и плиты
            • Стержни и держатели стержней
            • Системы позиционирования
          • Оптика для передачи изображения
          • Тест-объекты для микроскопов
          • Камеры
          • Окуляры
          • Увеличительные стекла
      • Основы микроскопии
        • Назад
        • Основы микроскопии
        • Конфокальная микроскопия
          • Назад
          • Конфокальная микроскопия
          • Лазерная сканирующая микроскопия
          • Основные принципы метода
        • Мультифотонная микроскопия
          • Назад
          • Мультифотонная микроскопия
          • Основы мультифотонной микроскопии
          • Лазерная сканирующая микроскопия
        • Общие принципы
          • Назад
          • Общие принципы
          • Основные характеристики и маркировка объективов
          • Освещение по Келеру
          • Влияние конденсора микроскопа на разрешение изображения
          • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
        • Флуоресцентная микроскопия
          • Назад
          • Флуоресцентная микроскопия
          • Микроскопия плоскостного освещения
          • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
        • Электрофизиология
          • Назад
          • Электрофизиология
          • Приборы и методы
            • Назад
            • Приборы и методы
            • Что такое электрофизиология?
            • Лаборатория электрофизиологии
            • Электрофизиологическое оборудование
          • Патч-кламп
            • Назад
            • Патч-кламп
            • Патч-кламп – метод электрофизиологии
            • Потенциал действия
            • Основные понятия и принципы. Сбор данных
            • Непрерывный одноэлектродный патч-кламп (cSEVC)
            • Прерывистый одноэлектродный патч-кламп (dSEVC)
        • Оптогенетика
          • Назад
          • Оптогенетика
          • Оптогенетическая стимуляция
            • Назад
            • Оптогенетическая стимуляция
            • Что такое оптогенетика?
            • Оборудование для оптогенетики
            • Выбор источника света для оптогенетики: светодиод или лазер
            • Оптогенетика широкого поля и оптогенетика клеточного разрешения
            • Cистемы для оптогенетики клеточного разрешения
          • Кальциевая визуализация in vivo
            • Назад
            • Кальциевая визуализация in vivo
            • Что такое визуализация кальция in vivo?
            • Базовое оборудование для визуализации кальция in vivo
            • Системы для визуализации кальция in vivo
            • Интеграция оптогенетики и визуализации кальция in vivo
      • Проекты
        • Назад
        • Проекты
        • Микроскопия
        • Оптогенетика
        • Спектроскопия
      • Вебинары
        • Назад
        • Вебинары
        • Вебинары Abberior Instruments
          • Назад
          • Вебинары Abberior Instruments
          • STED микроскопия живых клеток
          • STED PAINT микроскопия
          • Адаптивная оптика в STED микроскопии
          • "Микроскоп MINFLUX - революция в флуоресцентной микроскопии" - вебинар Нобелевского лауреата
          • Демонстрация и принцип работы модуля STEDYCON
        • Вебинары Andor
          • Назад
          • Вебинары Andor
          • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 2
          • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 1
          • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах sCMOS
          • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах EMCCD
          • Чувствительность sCMOS камер Andor с задней подсветкой для микроскопии
        • Вебинары Becker&Hickl
          • Назад
          • Вебинары Becker&Hickl
          • Метаболическая визуализация: одновременная регистрация FLIM изображений NAD(P)H и FAD
          • Оптимизация визуализации, аппроксамация и анализ автофлуоресцентных NAD(P)H и FAD
          • Исследование метаболизма в живых клетках рака предстательной железы: двухфотонная FLIRR микроскопия
          • Руководство для чайников по FLIM / FRET
          • Отслеживание концентрации кислорода методом гашения фосфоренценции
          • ПО SPCImage NG: извлечение информации из FLIM данных
        • Вебинары Confocal.nl
          • Назад
          • Вебинары Confocal.nl
          • Микроскопия сверхвысокого разрешения при слабой мощности излучения
          • Принцип работы оптического модуля RCM для конфокальной микроскопии
          • Преодоление ограничений оптической микроскопии с помощью модуля RCM
          • Визуализация живых клеток с помощью инкубаторов Tokai Hit и модуля RCM
          • Оптический модуль RCM для конфокальной микроскопии и ПО Volocity
          • Получение разрешения 120 нм на RCM с ПО Microvolution
          • Детекторы совместимые с RCM модулем для конфокальной микроскопии
        • Вебинары Double Helix Optics
          • Назад
          • Вебинары Double Helix Optics
          • Технология фазовых масок Double Helix для исследования полимерных структур
          • Обзор технологии 3D визуализации Double Helix
          • Отслеживание траекторий одиночных молекул в 3D с помощью технологии Double Helix
        • Вебинары Elveflow
          • Назад
          • Вебинары Elveflow
          • Как собрать набор для рециркуляции от Elveflow?
          • Поток и рециркуляция среды в культуре клеток на микрофлюидном чипе
        • Вебинары Femtonics
          • Назад
          • Вебинары Femtonics
          • Новейшие разработки в области нейробиологии и многофотонной визуализации
          • Настройтесь на мозг — многофотонная микроскопия
          • Atlas для мозга: двухфотонная флуоресцентная микроскопия
        • Вебинары Molecular Devices
          • Назад
          • Вебинары Molecular Devices
          • Использование электрофизиологических исследований для изучения работы мозга
          • Пакетный анализ данных с помощью новой функции ПО Axon pCLAMP 11
        • Вебинары Thorlabs
          • Назад
          • Вебинары Thorlabs
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 4
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 3
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 2
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 1
          • Как выбрать лазерный источник и оптику для мультифотонного микроскопа
          • Как правильно подобрать камеру для микроскопа
      • Условия работы
        • Назад
        • Условия работы
        • Оформление заказа
        • Оплата заказа
        • Доставка
        • Наши преимущества
        • Услуги
      • Информация
        • Назад
        • Информация
        • Новости
        • Статьи
        • Вопрос ответ
        • Обзоры
        • Мероприятия
      • Контакты
      • Мой кабинет
      • Корзина0
      • 8 (800) 551-20-97
        • Назад
        • Телефоны
        • 8 (800) 551-20-97
        • +7 (495) 792-39-88
        • +7 (812) 407-10-47
        • Заказать звонок
      Москва, Шаболовка, 10
      info@azimp-micro.ru
      info@azimp-micro.ru
      • Главная
      • Информация
      • Статьи
      • Количественная оценка разрешающей способности системы трехмерной локализационной микроскопии Leica SR GSD 3D с использованием двумерных и трехмерных маркеров-нанолинеек

      Количественная оценка разрешающей способности системы трехмерной локализационной микроскопии Leica SR GSD 3D с использованием двумерных и трехмерных маркеров-нанолинеек

      23 января 2020 13:30
      // Микроскопия
      Демонстрация использования маркеров-нанолинеек для количественного определения разрешения на примере микроскопа Leica SR GSD 3D. 

      Авторы:

      Carsten Forthmann, Jürgen J. Schmied (GATTAquant GmbH, Braunschweig, Germany), Tamara Straube  (Leica Microsystems)

      Флуоресцентные маркеры-нанолинейки на основе структур ДНК-оригами, производимые компанией GATTAquant, представляют собой идеальные тестовые образцы, которые в течение нескольких минут сообщают Вам о состоянии Вашего микроскопа и помогают качественно тестировать настройки и конфигурацию Вашего микроскопа со сверхвысоким разрешением. В данной статье маркеры-нанолинейки использовались для тестирования производительности микроскопа Leica SR GSD 3D. Были использованы как двумерные, так и трехмерные структуры, изображения которых были получены со сверхвысоким разрешением с помощью техники микроскопии супер-разрешения на основе локализации DNA-PAINT. Результаты показывают, что эти наноразмерные структуры являются оптимальными тестовыми образцами для количественного определения разрешения.

      Вступление

      Одной из основных проблем световой микроскопии всегда было ограниченное оптическое разрешение, вызванное дифракционными эффектами, которые были описаны Эрнстом Аббе в 1873 году [1]. Это приводит к проблеме, заключающейся в том, что микроскопические изображения с большим увеличением выглядят размытыми и скрывают информацию о структурных деталях в исследуемом образце. В последние годы появилось несколько методов микроскопии, которые преодолевают дифракционный предел Аббе, давая возможность получать микроскопические изображения с гораздо более высоким разрешением. Эти так называемые методы микроскопии сверхвысокого разрешения используют физический (например, STED [2] или SIM [3]) или химический подход (например, GSDIM [4] или DNA-PAINT [5]) для увеличения оптического разрешения. Этот прорыв в области микроскопии сверхвысокого разрешения был удостоен Нобелевской премии по химии в 2014 году. Однако в течение длительного времени у этих методов была проблема, заключающаяся в том, что не было стандартизированного способа количественного определения достигнутого разрешения определенного микроскопа сверхвысокого разрешения. Кроме того, часто неясно, какой из методов сверхвысокого разрешения является наиболее подходящим для ответа на конкретный биологический вопрос. До настоящего времени наиболее распространенным способом демонстрации эффективности техники сверхвысокого разрешения являлась визуализация цитоскелета [6]. Таким образом, структуры из эукариотических цитоскелетов, таких как микротрубочки или актиновые нити, могут быть визуализированы как ограниченные дифракцией изображения, а также изображения со сверхвысоким разрешением. Затем оба изображения показываются вместе (рис. 1 а, b), подчеркивая улучшение разрешения, хотя и качественным способом. Для количественного определения пространственного разрешения обычно выбирают две нити, которые расположены параллельно и близко друг к другу и являются узко разрешаемыми (рис. 1b), и проводят измерение расстояния между ними. Самое короткое расстояние, найденное таким образом, называется достигнутым пространственным разрешением (рисунок 1d).

      Рис. 1: Демонстрация типового разрешения с использованием клеточных структур: изображение TIRF (a) и изображение сверхвысокого разрешения (b) иммобилизованных нитей актина и выделенной области увеличения (c) с соответствующей гистограммой сечения (d).

      Это, конечно, кажется очень произвольным методом определения оптического разрешения, поскольку нет никакого контроля за распределением изображенных нитей и особенно расстояний между ними. Кроме того, из-за того, что каждое расстояние между нитями уникально, статистический анализ невозможен. Стремление во всех отношениях разработать лучшие стандарты разрешения привело к разработке стандартов определения сверхвысокого разрешения на основе структур ДНК-оригами [7].

      Метод ДНК-оригами

      Основной технологией для построения этих определенных структур на наноразмерном уровне, изобретенной в 2006 году Полом Ротемундом, является так называемая техника «ДНК-оригами» [8]. Структура ДНК-оригами состоит из длинной (около 7000–8000 пар оснований) одноцепочечной молекулы ДНК, так называемой «цепочки каркаса» (рис. 2а). Путем добавления около 200 коротких одноцепочечных молекул ДНК (так называемых «штапельных нитей»), которые имеют комплементарные последовательности, к различным частям цепочки каркаса, соответствующие части каркаса могут быть соединены друг с другом (Рисунок 2b-d). Посредством этих определенных соединений каркас может быть сложен по желанию в любую структуру, посредством чего создание формы выполняется путем правильного выбора последовательностей сшивания нитей. Нагревая нити каркаса вместе с короткими штапельными нитями, буфером и солями и медленно охлаждая их до комнатной температуры, происходит процесс складывания, и структура ДНК-оригами складывается в собранную конструкцию.

      Типичные структуры ДНК-оригами имеют размеры от 50 до 300 нм и могут иметь форму плоских прямоугольников, стержней, кубиков, но, по существу, любой формы, как показано на рисунке 3.

      Известно, что положение каждой короткой основной нити в структуре ДНК-оригами дает возможность расположения молекул органических красителей с нанометровой точностью на структурах ДНК-оригами. Следовательно, соответствующую штапельную цепь необходимо пометить молекулой органического красителя, которая затем включается в структуру ДНК-оригами в процессе складывания (рис. 2, d). Поскольку каждая из около 200 основных нитей может быть помечена по желанию индивидуально, структуры ДНК-оригами можно рассматривать как молекулярный макет, который позволяет позиционировать молекулы органических красителей и практически каждый объект, который может быть прикреплен к одноцепочечной ДНК с точностью до нанометра (рис. 2f). Это позволяет создавать флуоресцентные метки на структурах ДНК-оригами с определенными расстояниями между ними, а также с определенным количеством молекул красителя, что является идеальной структурой для проверки достижимого пространственного разрешения флуоресцентных микроскопов и особенно микроскопов со сверхвысоким разрешением.

      Рис. 2: Схематическое изображение конструкции ДНК-оригами и ее использование в качестве наноскопической линейки: (a-d): Сворачивание структуры ДНК-оригами путем добавления основных нитей к каркасу. (е): Добавление молекул красителя с использованием меченых штапельных нитей. (f): Основное использование структуры ДНК-оригами в качестве молекулярного макета.

      Из-за высокой параллельности метода ДНК-оригами каждое изображение содержит не только одну нанолинейку, но и миллионы идентичных нанолинеек, что обеспечивает возможность измерения достижимого пространственного разрешения микроскопов сверхвысокого разрешения и вычисление статистических ошибок этого измерения [6]. Буфер изображения, а также плотность молекул красителя можно регулировать в соответствии с условиями, которые можно найти в реальных образцах, представляющих интерес.

      Компания GATTAquant - молодая начинающая компания, которая занимается разработкой и изготовлением нанолинеек на основе ДНК-оригами для любого типа микроскопии сверхвысокого разрешения. Являясь дочерним предприятием группы профессора Филиппа Тиннефельда из Университета Брауншвейга, компания обладает огромным опытом в области нанотехнологий ДНК, в области фотофизики и визуализации в сверхвысоком разрешении.

      Рис. 3: Схематичное изображение нескольких нанолинеек компании GATTAquant

      Этот экспертный опыт привел к разработке многих высококачественных наноразмерных продуктов для различных методов микроскопии сверхвысокого разрешения таких как STED, SIM, GSDIM (dSTORM) и DNA-PAINT, а также для традиционной конфокальной микроскопии ограниченной дифракцией (рис. 3) [7].

      Микроскопия сверхвысокого разрешения с ДНК-краской

      Подход, основанный на микроскопии локализации, особенно метод ДНК-краски (DNA-PAINT), будет объяснен ниже более подробно. Микроскопия на основе локализации использует тот факт, что центроид одной молекулы красителя, хотя его сигнал на детекторе является размытым пятном, может быть рассчитан с высокой точностью и со стандартным отклонением (которое зависит от количества фотонов), которое намного меньше, чем размер размытого пятна. В настоящее время типовая точность локализации (стандартное отклонение) молекул органических красителей находится в диапазоне 5–10 нм [9]. Однако для расчета центроидов молекул органических красителей необходимо убедиться, что в любой данный момент времени только одна молекула красителя излучает свет в области пятна, ограниченного дифракцией. Чтобы обеспечить это условие, эмиссия перекрывающихся молекул должна быть временно разделена путем возбуждения "мигающей" эмиссии. Затем мигающие молекулы могут быть впоследствии локализованы и, наконец, из всех этих локализаций может быть восстановлено изображение сверхвысокого разрешения. Основным отличием всех методов микроскопии сверхвысокого разрешения, основанных на локализации, является то, как они используются, чтобы заставить молекулы мигать. Большинство методов (таких как GSDIM, dSTORM или PALM) используют фотофизическое переключение молекул между флуоресцентным включенным и нефлуоресцентным выключенным состоянием, которое возбуждается фотонами света или химическими реакциями. Совершенно другой подход применяется методом ДНК-краски (DNA-PAINT). Здесь структура, подлежащая визуализации, помечена непосредственно не флуоресцентными молекулами, а одноцепочечными цепями ДНК, которые работают как места связывания для меченой красителем одноцепочечной ДНК, так называемыми нитями формирователя изображения. Длина нитей формирователя изображения достаточно коротка, чтобы связывать только временно, что приводит к множественным событиям связывания и развязывания на каждом месте связывания. Поскольку молекулы органического красителя нитей формирователя изображения видны только при связывании со структурами ДНК-оригами на поверхности и невидимы, когда они свободно диффундируют в растворе, такое место связывания имеет такую ​​же излучающую характеристику, что и одна молекула мигающего красителя (рисунок 4) [5].

      Рис. 4: Иллюстрация метода визуализации ДНК-краски. Временное связывание цепи формирования изображения со структурой ДНК-оригами

      Тем не менее, есть несколько преимуществ по сравнению с одной мигающей молекулой красителя. Наиболее важным из них является тот факт, что образцы ДНК-краски не подвержены фотообесцвечиванию, поскольку молекулы органических красителей обмениваются каждый раз, когда новая нить формирователя изображения связывается со структурой ДНК-оригами. Кроме того, методика требует только одного источника возбуждения, и мультиплексирование является простым процессом. Основанная на методе ДНК-краски серия тестовых маркеров GATTA-PAINT предлагает нанолинейки, содержащие три метки с расстояниями от метки до метки 20 нм, 40 нм или 80 нм. Чтобы протестировать достижимое пространственное разрешение микроскопов на основе методов локализации в сверхвысоком разрешении на основе 3D локализации, компания GATTAquant в настоящее время разрабатывает нанолинейки, которые обеспечивают расстояния между маркерами также в осевом направлении. Одна многообещающая структура ДНК-оригами имеет форму тетраэдра с осевым расстоянием 80 нм.

      Коррекция дрейфа в методе ДНК-краски

      Общей проблемой, особенно в микроскопии сверхвысокого разрешения на основе локализации, когда время записи изображения может легко превысить несколько минут, является проблема бокового и осевого дрейфа образца, вызванная механической и/или тепловой нестабильностью, приводящей к размытому изображению, которое не содержит любые разрешимые структуры.

      Дрейфа можно избежать во время получения изображения с помощью стабильной платформы формирования изображений или с помощью автофокуса. Поправка на боковой дрейф может быть выполнена после получения изображения путем постобработки полученных данных. Поэтому к образцу добавляются так называемые фидуциальные маркеры, которые служат ориентирами. Контрольные точки локализуются в каждом кадре во время получения изображения, что приводит к временному следу X- и Y-координат каждого контрольного маркера. Отдельные следы всех выбранных фидуциальных маркеров затем объединяются в один временный след для координат X и Y.

      Для обоих рассчитывается компенсационная кривая, которая обычно выполняется с помощью подбора полинома или некоторого скользящего среднего алгоритма. Эта компенсационная кривая затем вычитается из всех координат в изображении со сверхвысоким разрешением. Обычные фидуциальные маркеры представляют собой флуоресцентные шарики, то есть наноразмерные сферы, заполненные молекулами красителя. Однако они демонстрируют пару недостатков: сигнал флуоресценции обычно слишком яркий, то есть он насыщает детектор, динамический диапазон которого оптимизирован для обнаружения одной молекулы. Сигнал шарика не является постоянным во времени и снижается из-за эффектов фотообесцвечивания, и шарики обычно не идеально прилипают к поверхности, то есть их положения не стабильны во времени.

      Эти недостатки можно преодолеть с помощью DNA-PAINT-фидуциальных маркеров на основе структуры ДНК-оригами (далее именуемых PAINT-FM). Маркеры PAINT-FM представляют собой структуры ДНК-оригами, которые несут множество мест связывания ДНК-краски, гарантирующих, что в условиях ДНК-краски в любой данный момент пара молекул красителя будет расположена на маркере PAINT-FM. Это дает не отбеливающий флуоресцентный сигнал, исходящий от маркера PAINT-FM, который достаточно яркий, чтобы обеспечить достаточно точную локализацию маркера PAINT-FM, но не слишком яркий для детектора. Кроме того, маркеры PAINT-FM могут быть стабильно связаны с поверхностью посредством связки биотин-нейтравидин-биотин, то есть они сохраняют стабильное положение во времени. Эти преимущества по сравнению с обычными шариками делают маркеры PAINT-FM в сочетании с нанолинейками GATTA-PAINT идеальным тестовым образцом для микроскопии сверхвысокого разрешения на основе локализации.

      Измерение разрешения с помощью микроскопа Leica SR GSD 3D

      Чтобы выполнить измерение сверхвысокого разрешения по методу GSD, предметное стекло, содержащее готовые к использованию маркеры-нанолинейки GATTA-PAINT (рис. 5а), должно быть закреплено во вставке образца. Дальнейшая пробоподготовка не требуется. После настройки камеры и параметров изображения и определения глубины проникновения с помощью программного обеспечения изображение со сверхвысоким разрешением напрямую восстанавливается во время получения изображения. Сигналы одиночного излучателя устанавливаются с помощью алгоритма Гаусса или центра масс.

      После завершения измерения данные отображались в многоцветном изображении (рис. 5b) и анализировались с помощью программного инструмента GATTAnalysis компании GATTAquant. Поэтому данные локализации, сохраненные в виде файла электронной таблицы, были импортированы в программное обеспечение GATTAnalysis, гарантируя, что различные столбцы файла данных были правильно связаны с соответствующими наборами данных. После импорта данные отображались в виде изображения в основном пользовательском интерфейсе. На втором этапе в изображении были обнаружены наноразмерные структуры. Это можно сделать полностью автоматически с помощью точечного источника или вручную, щелкнув соответствующие структуры. Затем выбранные структуры были проанализированы относительно расстояния от метки до метки и FWHM (полная ширина на половине максимума) каждой метки. Статистическим анализом этих значений результат сравнивался с расчетным значением расстояния (рис. 5c, d). Это сравнение, проведенное для измерений нанолинеек GATTA-PAINT 40RG, показало, что микроскоп Leica GSD легко способен различать образцы в поперечном направлении с расчетным расстоянием 40 нм в красном и зеленом каналах.

      Если расстояния намного меньше, чем эти 40 нм, обычно боковой дрейф становится значительной проблемой. Поэтому были добавлены маркеры PAINT-FM к образцу с нанолинейками GATTA-PAINT 20R. Затем этот комбинированный образец также измеряли на микроскопе Leica SR GSD и после измерения подвергали последующей обработке для корректировки бокового смещения (рис. 5e-g). Это измерение доказало, что разрешение на расстоянии 20 нм было таким же, как и на большем расстоянии. Однако нескорректированные данные указывают на то, что в этом случае необходима достаточная коррекция дрейфа.

      Рис. 5: (a): Схема нанолинейки GATTA-PAINT 40RG (красно-зеленая двухцветная тройная метка с расстоянием 40 нм). (b): GSD-изображение нанолинеек GATTA-PAINT 40RG. (c): Оценка красного канала с использованием программного обеспечения GATTAnalysis. (d): Оценка зеленого канала с использованием программного обеспечения GATTAnalysis. (e): Схематическая иллюстрация нанолинейки DNA-PAINT, изображенной вместе с маркером PAINT-FM. (f-g): Нескорректированное (f) и дрейф-корректированное (g) изображение сверхвысокого разрешения образца, содержащего нанолинейки GATTA‑PAINT 20 нм и маркер PAINT-FM.

      Кроме того, на микроскопе Leica SR GSD была также измерена трехмерная структура на основе ДНК-оригами. Структура представляла собой тетраэдр с длиной ребра 100 нм и флуоресцентной меткой (место связывания ДНК-краски) на каждой вершине [10]. Осевое расстояние составляло 80 нм. Эта структура также была легко различима с помощью микроскопа Leica SR GSD 3D (Рис. 6b).

      Для получения 3D изображения с высоким разрешением цилиндрическая линза вставляется в путь эмиссионного пучка, создавая астигматизм. Для каждой отдельной Z-позиции измеряется форма сигнального пятна, что в итоге приводит к корреляции между формой пятна и Z-позицией. Эта корреляция затем может быть использована для осевой локализации молекул красителя (рис. 6а).

      Для количественных измерений расстояния полученные значения Z должны были быть скорректированы из-за эффекта, вызванного показателем преломления. Это связано со следующей особенностью: прежде чем измерить абсолютные значения для Z-координаты излучателя, микроскоп необходимо откалибровать. Это делается путем регистрации флуоресцентного шарика в 3D. Полученные значения формы PSF как функции от осевого положения затем используются для вычисления координат молекул образца. Однако, поскольку флуоресцентный шарик, используемый для калибровки, непосредственно прикреплен к поверхности, путь прохождения света через раствор отсутствует, как при окончательном измерении сверхвысокого разрешения. Это приводит к несоответствию дифракционного индекса между калибровкой и измерением. Чтобы преодолеть этот эффект, все значения Z должны быть скорректированы с помощью определенного поправочного коэффициента, который может быть определен согласно Schmied, Forthmann et al. [11]. Для этого измерения поправочный коэффициент был определен до значения 0.42. После коррекции измеренное расстояние от метки до метки маркера соответствовало теоретическому значению тетраэдра.

      (a) 

      (b) 

      Рис. 6: (a) Принцип трехмерного GSD: Для обеспечения возможности локализации молекул в направлении Z цилиндрическая линза внедрена в путь луча излучения микроскопа Leica SR 3D GSD, внося характерный астигматизм в функцию PSF. Величина искажения позволяет определить точное положение в измерении Z. (b) 3D GSD изображение 3D образца GATTA-PAINT 3В. Тетраэдр с четырьмя точками на расстоянии 80 нм и помечен флуорофором Atto655. Цветовое кодирование глубины показывает положение в измерении Z.

      Выводы

      После преодоления оптического дифракционного барьера Аббэ с помощью передовых методов микроскопии, таких как STED, GSDIM / dSTORM или DNA-PAINT, одной из основных проблем визуализации со сверхвысоким разрешением стало отсутствие стандартизированного способа количественной оценки достижимого пространственного разрешения. Это было решено исследователями из университета Брауншвейга путем разработки тестовых маркеров-нанолинеек на основе ДНК-оригами, которые в настоящее время коммерциализируются компанией GATTAquant. В статье было продемонстрировано, что эти нанолинейки в микроскопе Leica SR GSD 3D, показав, что эти наноразмерные структуры являются идеальными стандартами разрешения, которые подтверждают, что микроскопы Leica являются очень хорошо работающей системой формирования изображения с боковым разрешением лучше 40 нм и осевым разрешением лучше 80 нм.

      Используемая литература:

      1. Abbe E: Beiträge zur Theorie des Mikroskops und der mikroskopischen Wahrnehmung. Archiv für Mikroskopische Anatomie 9 (1): 413–68 (1873).

      2. Klar T, Jakobs S, Dyba M, Egner A, und Hell SW: Fluorescence microscopy with diffraction resolution barrier broken by stimulated emission. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97 (15): 8206–10 (2000).

      3. Gustafsson M, Shao L, Carlton P, Wang C, Golubovskaya I, Cande W, Agard D, and Sedat S: Three-dimensional resolution doubling in wide-field fluorescence microscopy by structured illumination. Biophys. J. 94 (12): 4957–70 (2008).

      4. Fölling J, Bossi M, Bock H, Medda R, Wurm C, Hein B, Jakobs S, Eggeling C, und Hell SW: Fluorescence nanoscopy by ground-state depletion and single molecule return. Nat. Methods 5: 943–45 (2008).

      5. Jungmann R, Steinhauer C, Scheible M, Kunzyk A, Tinnefeld P, and Simmel F: Single-Molecule Kinetics and Super-Resolution Microscopy by Fluorescence Imaging of Transient Binding on DNA Origami. Nano Letters 10 (11): 4756–61 (2010).

      6. Schmied JJ, Raab M, Forthmann C, Pibiri E, Wünsch B, Dammeyer T, and Tinnefeld P: DNA origami–based standards for quantitative fluorescence microscopy. Nat. Protoc. 9: 1367 (2014).

      7. Schmied JJ, Gietl A, Holzmeister P, Forthmann C, Steinhauer C, Dammeyer T, and Tinnefeld P: Fluorescence and super-resolution standards based on DNA origami. Nat. Methods 9: 1133–34 (2012).

      8. Rothemund P: Folding DNA to create nanoscale shapes and patterns. Nature 440: 297–302 (2006).

      9. Raab M, Schmied JJ, Jusuk I, Forthmann C, and Tinnefeld P: Fluorescence microscopy with 6 nm resolution on DNA origami. ChemPhysChem 15 (12): 2431–35 (2014).

      10. Iinuma R., Ke Y, Jungmann R, Schlichthaerle T, Woehrstein JB, and Yin P: Polyhedra self-assembled from DNA tripods and characterized with 3D DNA-PAINT. Science 344: 65–69 (2014).

      11. Forthmann C, Schmied JJ, Pibiri E, Lalkens B, Nickels P, Liedl T, and Tinnefeld P: DNA origami nanopillars as standards for three-dimensional superresolution microscopy. Nano Letters 13 (2): 781–85 (2013).


      Теги
      Сверхвысокое разрешение

      • Prev
      • Next
      Товары
      • Фото Программное обеспечение GATTANALYSIS
        Программное обеспечение GATTANALYSIS
        Арт. GATTANALYSIS
        В корзину В корзине
      • Фото Маркеры-нанолинейки GATTA-AFM для атомно-силовой микроскопии
        Маркеры-нанолинейки GATTA-AFM для атомно-силовой микроскопии
        Арт. GATTA-AFM
        В корзину В корзине
      • Фото Маркеры золотые наногелики для электронной микроскопии
        Маркеры золотые наногелики для электронной микроскопии
        Арт. GOLD NANOHELICES
        В корзину В корзине
      • Фото Маркеры яркости Brightness для микроскопии
        Маркеры яркости Brightness для микроскопии
        Арт. Brightness
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-STORM NANORULER
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-STORM NANORULER
        Арт. GATTA-STORM NANORULER
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-PAINT 3D
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-PAINT 3D
        Арт. GATTA-PAINT 3D
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-PAINT HIRES
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-PAINT HIRES
        Арт. GATTA-PAINT HIRES
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-PAINT NANORULER
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-PAINT NANORULER
        Арт. GATTA-PAINT NANORULER
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-CONFOCAL NANORULER
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-CONFOCAL NANORULER
        Арт. GATTA-CONFOCAL NANORULER
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-STED 3D NANORULER
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-STED 3D NANORULER
        Арт. GATTA-STED 3D NANORULER
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-STED NANORULER
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-STED NANORULER
        Арт. GATTA-STED NANORULER
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-SIM NANORULER
        Флуоресцентные маркеры-нанолинейки GATTA-SIM NANORULER
        Арт. GATTA-SIM NANORULER
        В корзину В корзине
      • Фото Флуоресцентные шарики GATTA-BEADS
        Флуоресцентные шарики GATTA-BEADS
        Арт. GATTA-BEADS
        В корзину В корзине
      • Фото Предметные стекла с клетками GATTA-CELLS
        Предметные стекла с клетками GATTA-CELLS
        Арт. GATTA-CELLS
        В корзину В корзине
      • Комментарии
      Загрузка комментариев...

      Назад к списку Следующая статья
      Категории
      • 3D печать6
      • Аналитическое оборудование6
      • Апгрейды для микроскопов10
      • Изучение растений8
      • Исследования на животных2
      • Источники излучения4
      • Камеры для микроскопов8
      • Лабораторная посуда8
      • Микроскопия107
      • Микрофлюидика60
      • Нейробиология9
      • ОКТ3
      • Оптогенетика3
      • Счет фотонов8
      • Физиология10
      Это интересно
      • Исследование механизмов проникновения в клетку с помощью микроскопа Celloger Mini Plus от Curiosis
        Исследование механизмов проникновения в клетку с помощью микроскопа Celloger Mini Plus от Curiosis
        17 декабря 2024
      • Исследования в области биологии грибов с помощью микроскопов Celloger
        Исследования в области биологии грибов с помощью микроскопов Celloger
        13 декабря 2024
      • Оценка степени адипогенеза в режиме реального времени с помощью микроскопа  Celloger Pro
        Оценка степени адипогенеза в режиме реального времени с помощью микроскопа Celloger Pro
        6 декабря 2024
      • Наблюдение за данио-рерио с помощью функции съемки в режиме Z-стэка микроскопа Celloger® Mini Plus
        Наблюдение за данио-рерио с помощью функции съемки в режиме Z-стэка микроскопа Celloger® Mini Plus
        5 декабря 2024
      • Расширение возможностей оценки реакции клеток на лекарственные препараты с помощью микроскопа Celloger® Pro
        Расширение возможностей оценки реакции клеток на лекарственные препараты с помощью микроскопа Celloger® Pro
        3 декабря 2024
      • Исследование противоракового эффекта нокодазола на сфероидах с помощью микроскопов Celloger® Mini Plus
        Исследование противоракового эффекта нокодазола на сфероидах с помощью микроскопов Celloger® Mini Plus
        22 ноября 2024
      • Наблюдение за процессом митоза с помощью микроскопа Celloger® Mini Plus
        Наблюдение за процессом митоза с помощью микроскопа Celloger® Mini Plus
        20 ноября 2024
      • Мониторинг живых клеток: визуализация образцов с помощью микроскопа Celloger Mini Plus в течении нескольких суток
        Мониторинг живых клеток: визуализация образцов с помощью микроскопа Celloger Mini Plus в течении нескольких суток
        15 ноября 2024
      • Наблюдение динамических изменений актиновых филаментов во время деления клеток с помощью микроскопа Celloger Pro
        Наблюдение динамических изменений актиновых филаментов во время деления клеток с помощью микроскопа Celloger Pro
        13 ноября 2024
      • Исследование цитотоксичности с помощью микроскопов Celloger Nano и Celloger Mini Plus
        Исследование цитотоксичности с помощью микроскопов Celloger Nano и Celloger Mini Plus
        12 ноября 2024
      • Исследование апоптоза и трансфекции с помощью микроскопа Celloger Nano от Curiosis
        Исследование апоптоза и трансфекции с помощью микроскопа Celloger Nano от Curiosis
        20 августа 2024
      • Количественное определение мембранного потенциала митохондрий с помощью микроскопа Celloger Pro
        Количественное определение мембранного потенциала митохондрий с помощью микроскопа Celloger Pro
        19 августа 2024
      • Система автофокусисровки PureFocus850 для микроскопии в медико-биологических приложениях
        Система автофокусисровки PureFocus850 для микроскопии в медико-биологических приложениях
        30 июля 2024
      • Cканирующая ион-проводящая микроскопия (SICM) и материаловедение
        Cканирующая ион-проводящая микроскопия (SICM) и материаловедение
        22 сентября 2023
      • Локальные биосенсоры и нанозонды со сканирующей ион-проводящей микроскопией (SICM)
        Локальные биосенсоры и нанозонды со сканирующей ион-проводящей микроскопией (SICM)
        21 сентября 2023
      • Системы Femtonics – готовое решение для мультифотонной микроскопии
        Системы Femtonics – готовое решение для мультифотонной микроскопии
        21 сентября 2023
      • Cканирующая ион-проводящая микроскопия (SICM) и наномеханика
        Cканирующая ион-проводящая микроскопия (SICM) и наномеханика
        20 сентября 2023
      • In vivo визуализация при работе с животными со свободным поведением с помощью микроскопа FEMTO3D Atlas от Femtonics
        In vivo визуализация при работе с животными со свободным поведением с помощью микроскопа FEMTO3D Atlas от Femtonics
        19 сентября 2023
      • Cканирующая ион-проводящая микроскопия (SICM) и локальное дозирование
        Cканирующая ион-проводящая микроскопия (SICM) и локальное дозирование
        15 сентября 2023
      • Фотостимуляция и оптогенетика с использованием микроскопа FEMTOSmart
        Фотостимуляция и оптогенетика с использованием микроскопа FEMTOSmart
        15 сентября 2023
      Оптимальный выбор
      Оптимальный выбор Широкий ассортимент и подбор аналогов
      Привлекательные цены
      Привлекательные цены Всегда выгодные предложения
      Товар дня!
      Слайд-камера µ-Slide, 8 лунок
      Слайд-камера µ-Slide, 8 лунок
      Арт. 80826 / 80826-90 / 80821 / 80822 / 80824 / 80829
      В корзину В корзине
      Подписывайтесь на новости и акции:
      Компания
      О компании
      Поставщики
      Вакансии
      Клиенты
      Правила пользования сайтом
      Каталог
      Микроскопы
      Системы визуализации
      Модификация микроскопов
      Аксессуары для микроскопов
      Товары в наличии
      Микрофлюидика
      Электрофизиология
      Исследования на животных
      Лабораторные принадлежности
      Аналитическое оборудование
      FLIM микроскопия
      Источники излучения
      Научные камеры
      Реагенты и реактивы
      Каталог Edmund Optics
      Основы микроскопии
      Конфокальная микроскопия
      Мультифотонная микроскопия
      Общие принципы
      Флуоресцентная микроскопия
      Электрофизиология
      Оптогенетика
      Проекты
      Микроскопия
      Оптогенетика
      Наши контакты

      8 (800) 551-20-97
      +7 (495) 792-39-88
      +7 (812) 407-10-47
      Пн. – Пт.: с 9:30 до 18:00
      Москва, Шаболовка, 10
      info@azimp-micro.ru
      info@azimp-micro.ru
      © 2025 Все права защищены.
      Файлы cookie
      Мы используем файлы cookie, разработанные нашими специалистами и третьими лицами, для анализа событий на нашем веб-сайте, что позволяет нам улучшать взаимодействие с пользователями и обслуживание. Продолжая просмотр страниц нашего сайта, вы принимаете условия его использования. Более подробные сведения смотрите в нашей Политике в отношении файлов Cookie.
      Принимаю
      0

      Корзина

      Ваша корзина пуста

      Исправить это просто: выберите в каталоге интересующий товар и нажмите кнопку «В корзину»
      В каталог