Арт. Dhyana 400BSI V2.0
Чтобы изучить локализацию и ориентацию белков в субклеточных структурах, Пэн Си и его коллеги разработали микроскопию поляризованного структурированного освещения (pSIM).
Эта работа «расширяет возможности» существующей системы SIM, глубоко исследуя потенциальные характеристики технологии SIM и коммерческих инструментов, а также исследует присущие существующей системе SIM обнаружение поляризации, которые не заметили даже ее изобретатели, так что существующая система может реализовать функцию поляризации SIM без каких-либо модификаций. Это позволяет многим медико-биологическим лабораториям с SIM-системами напрямую анализировать поляризационную SIM-карту, что значительно продвинет исследования в области поляризационных изображений со сверхвысоким разрешением.
Изображение ориентации коротких актиновых филаментов. a) Динамическая визуализация управляемого миозином движения меченого фаллоидином актинового филамента. Белый прямоугольник содержит траекторию короткого актинового филамента. b) Увеличенный вид области, обведенной желтым прямоугольником, на (a). Ориентация диполей актиновых филаментов меняется по мере их движения. c) Покадровая ориентация и положение фрагментированного актина в (b). d) 2D-pSIM-изображение актиновых филаментов в нейронах гиппокампа, которое четко различает непрерывные длинные актиновые филаменты в дендрите и область дискретной структуры актинового кольца в аксоне. e) Еще одна иллюстрация структуры актинового кольца в аксоне. f, g) Увеличенные изображения выделенных рамкой областей на (d), которые сравнивают результаты визуализации PM и pSIM. h) Профиль интенсивности линии, указанной в (e), преобразование Фурье которой (i) показывает периодичность 184 нм, что согласуется с ранее опубликованными результатами. j, k) Структура актинового кольца имеет решающее значение для ассоциированного с мембраной периодического скелета (MPS) в нейронах. Предыдущая модель предполагает сквозную организацию покрытых аддуцином актиновых филаментов. Однако pSIM показывает, что ориентация коротких актиновых филаментов параллельна стержню аксона, что поддерживает параллельную организацию структур актиновых колец. Масштаб: a) 2 мкм и d) – g) 1 мкм.
Анализ технологии визуализации
Оптическая система формирования изображений сверхвысокого разрешения QSIM является типичной системой формирования изображений при слабом освещении. Камера Dhyana 400BSI от Tucsen имеет пиковую квантовую эффективность 95% и шум считывания всего 1.2e-, что может помочь системе при слабом освещении получать изображения с высоким соотношением сигнал/шум. Размер пикселя 6.5 мкм подходит для объектива с 60-кратным увеличением. Это позволяет в полной мере использовать преимущества разрешения объектива и помогает системе получать изображения высокого разрешения с четкими деталями.
