STEDYCON - абсолютно новый класс микроскопов с нанометровым разрешением для STED и конфокальной микроскопии от компании Abberior Instruments. Данная система теперь поддерживает работу моторизованных столиков для объединения получаемых изображений образцов размером в несколько миллиметров.
Это позволяет осуществлять визуализацию образцов размером даже в несколько миллиметров целиком. Для этого используется мозаичное спиральное сканирование, которое позволяет осуществлять перемещение области интереса (ROI-region of interest) и визуализацию во всем размере Вашего образца. При этом могут быть заданы несколько областей интереса по порядку в очередь для автоматической записи нескольких изображений с помощью метода конфокальной или STED микроскопии, в то время как Вы продолжаете работать и используете время визуализации для подготовки следующего образца. Визуализация больших областей интереса получается в виде мозаичного сканирования и изображения могут быть легко сшиты с использованием, например, программного обеспечения SVI Huygens.
STED визуализация образца с характерным размером в несколько миллиметров путем сшивания нескольких фото
Рис. 1. Конфокальная визуализация больших областей образца. Показана область размером 2.8x2.5 мм, полученная с использованием отдельных изображений в виде мозаики 35 на 29 с помощью функции фиксации фокусировки STEADYFOCUS и сшитая программным обеспечением SVI Huygens. Образец: клетки млекопитающих, иммунизированные антителами к митохондриальному белку TOM20 (краситель Abberior Star RED, красный), двухцепочечная ДНК для визуализации митохондриальной ДНК (краситель Abberior Star ORANGE, зеленый), фаллоидин для метки F-actin (краситель Abberior Star Green, серый) и DAPI для метки ядра.
Рис. 2. STED изображение сверхвысокого разрешения больших областей образца. Возможность комбинирования STED визуализации c мозаичным сканированием и сшивкой изображений облегчает обнаружение редких событий, таких как деление клеток. Образец: клетки млекопитающих, иммунизированные антителами к митохондриальному белку TOM20 (краситель Abberior Star RED, красный) и двухцепочечной ДНК для визуализации митохондриальной ДНК (краситель Abberior Star ORANGE, зеленый). Мозаичные изображения были получены с использованием функции фиксации фокусировки STEADYFOCUS и сшитая программным обеспечением SVI Huygens.
Рис. 3. Конфокальное изображение корневища Convallaria (поперечное сечение) полученное с использованием 20-кратного масляного объектива; 3 канала, максимальная проекция интенсивности. Изображения состоят из 14 z-плоскостей в виде мозаики 9 на 9, общей площадью 3.2х3.2 мм, сшитых с использованием программного обеспечения SVI Huygens. Показана проекция максимальной интенсивности.
Рис. 4. Ядро кукурузы, продольный разрез окрашен синим толуидином. Изображение получено с использованием лазеров возбуждения с длинами волн 640 нм, 561 нм и 488 нм и 100-кратным объективом. Изображение состоит из 441 отдельных изображений сшитых с использованием программного обеспечения SVI Huygens.