Набор HighFidelity Cy5 предназначен для получения случайным образом Cy5-модифицированных ДНК-зондов с помощью ПЦР. Такие зонды идеально подходят для флуоресцентной гибридизации in situ (FISH) и экспериментов по нозерн-блоттингу. Мечение на основе ПЦР превосходит мечение со случайным праймированием фрагментом Кленова, если количество матрицы ограничено или требуется амплификация определенных фрагментов ДНК. Возможна амплификация зондов до 4 кбит/с.
dUTP-Cy5 эффективно встраивается в ДНК в качестве заменителя природного аналога dTTP с использованием оптимизированного реакционного буфера и смеси высокоточных полимераз, состоящей из Taq-полимеразы и корректирующего фермента. Замена 50 % dUTP-Cy5 обычно приводит к оптимальному балансу между эффективностью реакции и мечения. Однако индивидуальная оптимизация соотношения dUTP-Cy5/dTTP может быть легко достигнута с помощью однонуклеотидного формата. Набор содержит достаточное количество реагентов для 10 реакций мечения (S-Pack) или 50 реакций мечения (L-Pack) по 20 мкл каждая (замещение 50% dUTP-Cy5, 100 мкмоль dATP/dGTP/dCTP, 50 мкМ dTTP, 50 мкмоль dUTP-Cy5).