azimp-micro.ru
Ваш ориентир в Микроскопии
Ru En
+7 (495) 792-39-88
Пн. – Пт.: с 9:30 до 18:00
Заказать звонок
Москва, ул. Б. Тульская, д. 10 cтр. 5 (м. Тульская)
Компания
  • О компании
  • Сертификаты
  • Поставщики
  • Вакансии
  • Клиенты
  • Реквизиты
Каталог
  • Микроскопы
    Микроскопы
    • Биологические микроскопы
    • Флуоресцентные микроскопы
    • Контроль качества
    • Стереомикроскопы
    • Фазово-контрастные микроскопы
    • Цифровые микроскопы
    • Поляризационные микроскопы
    • Металлографические микроскопы
    • Модульные микроскопы
    • Делители изображений
  • Системы визуализации
    Системы визуализации
    • Конфокальные микроскопы
    • Мультифотонные микроскопы
    • Модульные микроскопы
    • Микроскопы сверхвысокого разрешения
    • Контроль качества
  • Научные камеры
    Научные камеры
    • CCD камеры
    • EMCCD камеры
    • HDMI камеры
    • sCMOS камеры
    • CMOS камеры
    • Делители изображений
  • Модификация микроскопов
    Модификация микроскопов
    • STED микроскопия
    • Конфокальная микроскопия
    • Микроскопия плоскостного освещения
  • Источники излучения
    Источники излучения
    • Многоволновые лазеры
    • Фемтосекундные лазеры
    • Ламповые источники
    • Светодиодные источники
  • Оптогенетика
    Оптогенетика
    • Системы in vivo визуализации и стимуляции
    • Структурированное освещение
  • Аксессуары для микроскопов
    Аксессуары для микроскопов
    • Моторизация микроскопа
    • Нагревательные столики
    • Делители изображений
    • Контроль качества
  • Каталог Edmund Optics
    Каталог Edmund Optics
    • Микроскопы
    • Объективы для микроскопов
    • Фильтры для микроскопии
    • Оптомеханика
    • Оптика для передачи изображения
    • Тест-объекты для микроскопов
    • Камеры
    • Окуляры
    • Увеличительные стекла
Основы микроскопии
  • Конфокальная микроскопия
    • Лазерная сканирующая микроскопия
    • Основные принципы метода
  • Мультифотонная микроскопия
    • Основы мультифотонной микроскопии
    • Лазерная сканирующая микроскопия
  • Общие принципы
    • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
  • Флуоресцентная микроскопия
    • Микроскопия плоскостного освещения
    • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
Проекты
Мероприятия
  • Съезд Общества Физиологов Растений России
    • Съезд ОФР - 2019
  • Актуальные проблемы биофотоники
    • TPB-2019
  • Биосистемы: организация, поведение, управление
    • Биосистемы 2019
  • Фотоника. Мир лазеров и оптики
    • Фотоника 2019
Условия работы
  • Оформление заказа
  • Оплата заказа
  • Доставка
  • Наши преимущества
  • Услуги
Информация
  • Новости
  • Статьи
  • Вопрос ответ
  • Обзоры
  • Спецпредложения
Контакты
    azimp-micro.ru
    Компания
    • О компании
    • Сертификаты
    • Поставщики
    • Вакансии
    • Клиенты
    • Реквизиты
    Каталог
    • Микроскопы
      Микроскопы
      • Биологические микроскопы
      • Флуоресцентные микроскопы
      • Контроль качества
      • Стереомикроскопы
      • Фазово-контрастные микроскопы
      • Цифровые микроскопы
      • Поляризационные микроскопы
      • Металлографические микроскопы
      • Модульные микроскопы
      • Делители изображений
    • Системы визуализации
      Системы визуализации
      • Конфокальные микроскопы
      • Мультифотонные микроскопы
      • Модульные микроскопы
      • Микроскопы сверхвысокого разрешения
      • Контроль качества
    • Научные камеры
      Научные камеры
      • CCD камеры
      • EMCCD камеры
      • HDMI камеры
      • sCMOS камеры
      • CMOS камеры
      • Делители изображений
    • Модификация микроскопов
      Модификация микроскопов
      • STED микроскопия
      • Конфокальная микроскопия
      • Микроскопия плоскостного освещения
    • Источники излучения
      Источники излучения
      • Многоволновые лазеры
      • Фемтосекундные лазеры
      • Ламповые источники
      • Светодиодные источники
    • Оптогенетика
      Оптогенетика
      • Системы in vivo визуализации и стимуляции
      • Структурированное освещение
    • Аксессуары для микроскопов
      Аксессуары для микроскопов
      • Моторизация микроскопа
      • Нагревательные столики
      • Делители изображений
      • Контроль качества
    • Каталог Edmund Optics
      Каталог Edmund Optics
      • Микроскопы
      • Объективы для микроскопов
      • Фильтры для микроскопии
      • Оптомеханика
      • Оптика для передачи изображения
      • Тест-объекты для микроскопов
      • Камеры
      • Окуляры
      • Увеличительные стекла
    Основы микроскопии
    • Конфокальная микроскопия
      • Лазерная сканирующая микроскопия
      • Основные принципы метода
    • Мультифотонная микроскопия
      • Основы мультифотонной микроскопии
      • Лазерная сканирующая микроскопия
    • Общие принципы
      • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
    • Флуоресцентная микроскопия
      • Микроскопия плоскостного освещения
      • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
    Проекты
    Мероприятия
    • Съезд Общества Физиологов Растений России
      • Съезд ОФР - 2019
    • Актуальные проблемы биофотоники
      • TPB-2019
    • Биосистемы: организация, поведение, управление
      • Биосистемы 2019
    • Фотоника. Мир лазеров и оптики
      • Фотоника 2019
    Условия работы
    • Оформление заказа
    • Оплата заказа
    • Доставка
    • Наши преимущества
    • Услуги
    Информация
    • Новости
    • Статьи
    • Вопрос ответ
    • Обзоры
    • Спецпредложения
    Контакты
      azimp-micro.ru
      0
      • Компания
        • Назад
        • Компания
        • О компании
        • Сертификаты
        • Поставщики
        • Вакансии
        • Клиенты
        • Реквизиты
      • Каталог
        • Назад
        • Каталог
        • Микроскопы
          • Назад
          • Микроскопы
          • Биологические микроскопы
          • Флуоресцентные микроскопы
          • Контроль качества
          • Стереомикроскопы
          • Фазово-контрастные микроскопы
          • Цифровые микроскопы
          • Поляризационные микроскопы
          • Металлографические микроскопы
          • Модульные микроскопы
          • Делители изображений
        • Системы визуализации
          • Назад
          • Системы визуализации
          • Конфокальные микроскопы
          • Мультифотонные микроскопы
          • Модульные микроскопы
          • Микроскопы сверхвысокого разрешения
          • Контроль качества
        • Научные камеры
          • Назад
          • Научные камеры
          • CCD камеры
          • EMCCD камеры
          • HDMI камеры
          • sCMOS камеры
            • Назад
            • sCMOS камеры
            • sCMOS камеры Andor
            • sCMOS камеры Tucsen
          • CMOS камеры
            • Назад
            • CMOS камеры
            • CMOS камеры Thorlabs
            • CMOS камеры Tucsen
          • Делители изображений
        • Модификация микроскопов
          • Назад
          • Модификация микроскопов
          • STED микроскопия
          • Конфокальная микроскопия
          • Микроскопия плоскостного освещения
        • Источники излучения
          • Назад
          • Источники излучения
          • Многоволновые лазеры
          • Фемтосекундные лазеры
          • Ламповые источники
          • Светодиодные источники
            • Назад
            • Светодиодные источники
            • Светодиодные источники CoolLED
            • Светодиодные источники Excelitas
        • Оптогенетика
          • Назад
          • Оптогенетика
          • Системы in vivo визуализации и стимуляции
          • Структурированное освещение
        • Аксессуары для микроскопов
          • Назад
          • Аксессуары для микроскопов
          • Моторизация микроскопа
            • Назад
            • Моторизация микроскопа
            • Моторизированные столики
          • Нагревательные столики
          • Делители изображений
          • Контроль качества
        • Каталог Edmund Optics
          • Назад
          • Каталог Edmund Optics
          • Микроскопы
            • Назад
            • Микроскопы
            • Инвертированные и стереомикроскопы
            • Компактные и прямые микроскопы
            • Микроскопы Mitutoyo
            • Микроскопы Olympus
          • Объективы для микроскопов
            • Назад
            • Объективы для микроскопов
            • Объективы Mitutoyo
            • Объективы Nikon
            • Объективы Olympus
            • Объективы TECHSPEC®
            • Отражающие объективы
            • Модульные Zoom системы
            • Объективы с конечным задним фокусным расстоянием
            • Объективы с коррекцией на бесконечность
          • Фильтры для микроскопии
            • Назад
            • Фильтры для микроскопии
            • Коротковолновые фильтры
            • Нейтральные фильтры
            • Полосовые фильтры
            • Флуоресцентные фильтры
            • Длинноволновые и дихроичные фильтры
            • Колеса фильтров, фильтры в кубе
          • Оптомеханика
            • Назад
            • Оптомеханика
            • Держатели оптики
            • Оптические столы и плиты
            • Стержни и держатели стержней
            • Системы позиционирования
          • Оптика для передачи изображения
          • Тест-объекты для микроскопов
          • Камеры
          • Окуляры
          • Увеличительные стекла
      • Основы микроскопии
        • Назад
        • Основы микроскопии
        • Конфокальная микроскопия
          • Назад
          • Конфокальная микроскопия
          • Лазерная сканирующая микроскопия
          • Основные принципы метода
        • Мультифотонная микроскопия
          • Назад
          • Мультифотонная микроскопия
          • Основы мультифотонной микроскопии
          • Лазерная сканирующая микроскопия
        • Общие принципы
          • Назад
          • Общие принципы
          • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
        • Флуоресцентная микроскопия
          • Назад
          • Флуоресцентная микроскопия
          • Микроскопия плоскостного освещения
          • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
      • Проекты
      • Мероприятия
        • Назад
        • Мероприятия
        • Съезд Общества Физиологов Растений России
          • Назад
          • Съезд Общества Физиологов Растений России
          • Съезд ОФР - 2019
        • Актуальные проблемы биофотоники
          • Назад
          • Актуальные проблемы биофотоники
          • TPB-2019
        • Биосистемы: организация, поведение, управление
          • Назад
          • Биосистемы: организация, поведение, управление
          • Биосистемы 2019
        • Фотоника. Мир лазеров и оптики
          • Назад
          • Фотоника. Мир лазеров и оптики
          • Фотоника 2019
      • Условия работы
        • Назад
        • Условия работы
        • Оформление заказа
        • Оплата заказа
        • Доставка
        • Наши преимущества
        • Услуги
      • Информация
        • Назад
        • Информация
        • Новости
        • Статьи
        • Вопрос ответ
        • Обзоры
        • Спецпредложения
      • Контакты
      • Мой кабинет
      • Корзина0
      • +7 (495) 792-39-88
      Москва, ул. Б. Тульская, д. 10 cтр. 5 (м. Тульская)
      info@azimp-micro.ru
      • YouTube
      • Главная
      • Основы микроскопии
      • Флуоресцентная микроскопия
      • Фильтры для флуоресцентной микроскопии

      Фильтры для флуоресцентной микроскопии

      Микроскоп для визуализации флуоресценции использует 3 типа фильтров: запирающий, дихроичный и фильтр возбуждения. В статье описываются основные функции и особенности каждого типа фильтров, а также принцип работы флуорофоров.

      Флуорофоры

      Флуорофор - это молекула или часть молекулы, которая способна генерировать флуоресценцию. При воздействии света соответствующей частоты, необходимой для возбуждения молекулы из ее основного состояния в возбужденное состояние, происходит переход. Однако, находясь в возбужденном состоянии, молекула будет нестабильной. Через некоторое короткое время (обычно от 10-15 до 10-9 с) фотон высвобождается, что позволяет молекуле вернуться в состояние с более низкой энергией. Излучаемый свет будет иметь большую длину волны (более низкую энергию), чем поглощенное излучение, из-за потери энергии через различные механизмы, такие как вибрации, звук и тепловая энергия.

      Один флуорофор может непрерывно возбуждаться, если он не разрушится фотообесцвечиванием (то есть необратимым разрушением флуорофора из-за вызванного фотоном химического повреждения или ковалентной модификации). Среднее число циклов возбуждения и эмиссии, которые конкретный флуорофор может пройти перед фотообесцвечиванием, зависит от его молекулярной структуры и среды; некоторые флуорофоры быстро обесцвечиваются, испуская лишь несколько фотонов, в то время как другие гораздо более устойчивы и могут пройти тысячи или даже миллионы циклов, прежде чем произойдет разрушение.

      Фильтры для флуоресцентной микроскопии

      Экспериментальная установка на рисунке показывает типичные фильтры, используемые для эпифлуоресцентной микроскопии, типа микроскопии, в которой как возбуждающий, так и свет от образца проходят через объектив микроскопа. Тщательно выбирая подходящие фильтры и зеркала для конкретного применения, можно максимально увеличить отношение сигнал / шум. Как показано на схеме, три типа фильтров используются для максимизации сигнала флуоресценции при минимизации нежелательного излучения. Особенности каждого оптического элемента обсуждается ниже.

      Схема оптический путей флуоресцентного микроскопа

      Фильтры возбуждения

      Фильтр возбуждения пропускает только узкую полосу длин волн вокруг пиковой длины волны возбуждения флуорофора. Например, как показано на графике, полоса пропускания, соответствующая пропусканию более 90% для фильтра возбуждения желтого флуоресцентного белка (YFP) (MF497-16), составляет 489 - 505 нм; Падающее излучение за пределами этого диапазона либо частично (для областей вблизи области пропускания), либо полностью (для областей, расположенных дальше от полосы пропускания), блокируется фильтром.

      Графики коэффициента пропускания набора фильтров MDF-YFP. Обратите внимание, что дихроичное зеркало (зеленый) отражает свет в диапазоне длин волн возбуждения (синий) и пропускает свет в диапазоне длин волн излучения (зеленый).

      Дихроичный фильтр

      Дихроичные зеркала предназначены для отражения света, длина волны которого ниже определенного значения (то есть длины волны отсечки), в то же время позволяя всем другим длинам волн проходить через него без изменений. В микроскопе дихроичное зеркало направляет нужный диапазон длин волн на образец, а также на систему формирования изображения. Значение длины волны отсечки, связанное с каждым зеркалом, определяется как длина волны, которая соответствует 50% пропускания. Например, как показано на графике, длина волны отсечки для дихроичного зеркала желтого флуоресцентного белка (YFP) (MD515) составляет ~ 515 нм.

      Поместив одно из этих зеркал в экспериментальную установку под углом 45° относительно падающего излучения, возбуждающее излучение (показано синим на приведенном выше схематическом рисунке) отражается от поверхности дихроичного зеркала и направляется к образцу и объективу микроскопы, в то время как флуоресценция, исходящая от образца (показано красным на приведенной выше схеме), проходит через зеркало на систему детектирования.

      Хотя дихроичные зеркала играют решающую роль в флуоресцентной микроскопии, они не идеальны, когда речь идет о блокировке нежелательного света; как правило, ~ 90% света на длинах волн ниже значения длины волны отсечки отражаются, и ~ 90% света на длинах волн выше этого значения передаются дихроичным зеркалом. Следовательно, часть возбуждающего света может проходить через дихроичное зеркало вместе с более длинноволновой флуоресценцией, испускаемой образцом. Чтобы предотвратить попадание этого нежелательного света в систему детектирования, в дополнение к дихроичному зеркалу используется запирающий фильтр.

      Запирающий фильтр

      Запирающий фильтр необходим для обеспечения того, чтобы флуоресценция от образца достигала детектора, а излучение возбуждения было заблокировано. Подобно фильтру возбуждения, этот фильтр пропускает только узкую полосу длин волн вокруг пиковой длины волны излучения флуорофора. Например, как показано на графике, полоса пропускания, соответствующая пропусканию более 90% для запирающего фильтра желтого флуоресцентного белка (YFP) (MF535-22), составляет 524 - 546 нм; Падающее излучение за пределами этого диапазона либо частично (для областей вблизи области пропускания), либо полностью (для областей, расположенных дальше от полосы пропускания), блокируется фильтром.


      • Prev
      • Next
      Товары
      • Флуоресцентные микроскопы
        Флуоресцентный стереомикроскоп MS-STX-801
        Арт. MS-STX-801
        В корзину В корзине
      • Флуоресцентные микроскопы
        Флуоресцентный микроскоп MS-FL-100-LED
        Арт. MS-FL-100-LED
        В корзину В корзине
      • Флуоресцентные микроскопы
        Флуоресцентный микроскоп MS-FL-403
        Арт. MS-FL-403
        В корзину В корзине
      • Флуоресцентные микроскопы
        Флуоресцентный микроскоп MS-FL-301
        Арт. MS-FL-301
        В корзину В корзине
      • Комментарии
      Загрузка комментариев...

      Поделиться
      Назад к списку
      • Конфокальная микроскопия
      • Мультифотонная микроскопия
      • Общие принципы
      • Флуоресцентная микроскопия
        • Микроскопия плоскостного освещения
        • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
      Наши специалисты ответят на любой интересующий вопрос по услуге
      Задать вопрос
      Доставка в любой регион РФ
      Оптимальный выбор
      Оптимальный выбор Широкий ассортимент и подбор аналогов
      Привлекательные цены
      Привлекательные цены Всегда выгодные предложения
      Товар дня!
      Мультифотонные микроскопы Thorlabs
      Мультифотонные микроскопы Bergamo® II
      Арт. BERGAMO
      В корзину В корзине
      Подписывайтесь на новости и акции:
      Компания
      О компании
      Сертификаты
      Поставщики
      Вакансии
      Клиенты
      Реквизиты
      Каталог
      Микроскопы
      Системы визуализации
      Научные камеры
      Модификация микроскопов
      Источники излучения
      Оптогенетика
      Аксессуары для микроскопов
      Каталог Edmund Optics
      Основы микроскопии
      Конфокальная микроскопия
      Мультифотонная микроскопия
      Общие принципы
      Флуоресцентная микроскопия
      Возможности
      Оформление
      Кнопки
      Иконки
      Элементы
      Наши контакты

      +7 (495) 792-39-88
      Пн. – Пт.: с 9:30 до 18:00
      Москва, ул. Б. Тульская, д. 10 cтр. 5 (м. Тульская)
      info@azimp-micro.ru
      © 2019 Все права защищены.
      0

      Корзина

      Ваша корзина пуста

      Исправить это просто: выберите в каталоге интересующий товар и нажмите кнопку «В корзину»
      В каталог