Компания Becker&Hickl продемонстрировала работу двухфотонной FLIM системы с фемтосекундным волоконным лазером. Система состоит из сканера DCS-120 MP от Becker&Hickl, присоединенного к микроскопу Nikon TE, лазера Toptica Femto Fiber Pro с длиной волны 785 нм, гибридных детекторов HPM-100 и TCSPC FLIM системы с 2 TCSPC модулями SPC-150NX, контроллером сканирования GVD-120 и контроллером детекторов DCC-100.
Данные FLIM дрожжевых клеток, формат данных 512 x 512 пикселей, 1024 временных канала. Анализ с помощью ПО SPCImage NG, двойная экспоненциальная аппроксимация с помощью MLE. Слева: изображение среднего (взвешенного по амплитуде) времени жизни, tm. Вверху справа: гистограмма tm по пикселям. Внизу справа: кривая затухания в области 5 x 5 пикселей вокруг позиции курсора.
Было показано, что система идеально подходит для записи данных NADH FLIM из клеток и тканей. Она предоставляет высококачественные данные о распаде, подходящие для анализа двухэкспоненциальным методом. Таким образом, система способна регистрировать метаболическое состояние клеток и тканей посредством анализа амплитуд связанных и несвязанных компонентов NADH.
Двухфотонная FLIM система Becker&Hickl также записывает изображения автофлуоресценции с высоким разрешением от мелких организмов. Изображения FLIM также получают из окрашенных образцов, таких как клетки Invitrogen BPAE и образцы почек мыши. Доступной мощности возбуждения вполне достаточно для всех этих приложений. Все данные FLIM были записаны при мощности не более 6 мВт в плоскости образца. Повышение мощности было не только ненужным, но даже вызвало разрушительные эффекты в образцах.
Автофлуоресцентное FLIM-изображение рачной креветки, артемии соляной. Среднее (взвешенное по амплитуде) время жизни двухэкспоненциального распада. Функции распада выбранных областей показаны справа.
Подробнее о данной FLIM системе и полученных результатах можно узнать по ссылке:
Двухфотонная FLIM система Becker&Hickl с фемтосекундным волоконным лазером
Для получения технических консультаций, а также по вопросам приобретения FLIM систем Becker&Hickl обращайтесь к менеджерам компании АЗИМУТ ФОТОНИКС.