Новое поколение FLIM систем DCS-120 Becker&Hickl отличается беспрецедентным временным разрешением, высокими пространственным разрешением и чувствительностью и почти идеальной фотонной эффективностью. Время жизни флуоресценции может быть зарегистрировано с разрешением до 10 пс. Данные о распаде могут быть разделены на 4096 временных каналов с минимальной шириной временного интервала 405 фс. Число пикселей матрицы может достигать до 4096 x 4096. Конфокальная модель системы работает с пикосекундными диодными лазерами, двухфотонная модель с титан-сапфировым лазером или фемтосекундным волоконным лазером.
В FLIM системе DCS-120 используются гальванометрический сканер, конфокальное или не десканируемое детектирование, FLIM с помощью многомерной техники TCSPC. Функции сбора данных включают прецизионный двухканальный FLIM, лазерное мультиплексирование по длине волны, многоволновый FLIM, сверхбыструю запись временных серий с помощью временного мозаичного FLIM метода, пространственный мозаичный FLIM метод, регистрацию Z-стеков FLIM, визуализацию времени жизни фосфоресценции (PLIM ), временное сканирование времени жизни флуоресценции (FLITS) и т. д.
Слева: Конфокальная FLIM система DCS-120 Becker&Hickl. Справа: Визуализация времени жизни флуоресценции Artemis salinas, автофлуоресценция, возбуждение 405 нм.
Анализ данных выполняется с помощью SPCImage NG нового поколения. Анализ времени жизни выполняется с помощью GPU, что сокращает время вычислений с нескольких минут до нескольких секунд. Другими особенностями являются сегментация изображения с помощью векторного графика или двухмерных гистограмм во временной области, а также автоматическое моделирование IRF системы (аппаратной функции). Вместе с исключительной временной стабильностью системы записи повторная калибровка IRF больше не требуется.
FLIM спор Paxillus invutus. Компоненты быстрого распада, двухэкспоненциальная модель. Кривая распада в выбранной точке t1 составляет 30 пс. Система DCS-120 MP с лазером Toptica Femto Fiber Pro, 785 нм.
Главными областями применения новой системы DCS-120 Becker&Hickl являются молекулярная визуализация в живых клетках и тканях, эксперименты по взаимодействию белков (FRET), метаболическая визуализация с помощью параметров распада NADH / FAD, идентификация раковых клеток и регистрация динамических физиологических процессов клеточного метаболизма и неврология.