TIMEBOW от abberior — это надежный метод измерения времени жизни флуоресценции со сверхвысоким разрешением и без него. Визуализация сверхвысокого разрешения от abbeior уже позволяет получать потрясающие изображения во всех пространственных измерениях. Теперь abbeior делает то же самое с временем. Изображения в оттенках серого превращаются в красочные снимки с кодировкой цветом, а цветные графики времени жизни показывают невидимые структуры. Флуорофоры в одном и том же спектральном канале внезапно становятся четко разделенными, что дает вам больше каналов и большую гибкость, чем когда-либо прежде.
Времена жизни флуоресценции разделены на четыре вида на поперечном срезе стебля ландыша, что позволяет лучше вычленять различные структуры образца
4 цветные изображения с одним лазером STED? С TIMEBOW это возможно!
STED (слева) vs STED+Timebow (справа)
Четырехцветное окрашивание фиксированных клеток млекопитающих. Изображение, зарегистрированное с помощью FACILITY, показывает ядерные поры (NUP968, STAR RED), мембрану Гольджи (GM130, STAR 635), медиальные ободки Гольджи (Giantin, STAR ORANGE) и актин (STAR 580 фаллоидин). Показанные слева STAR RED и STAR 635 (пурпурный), только с использованием спектральной информации нельзя разделить из-за их схожих свойств возбуждения. То же самое касается STAR ORANGE и STAR 580 (серого цвета). Благодаря информации о времени жизни, собранной TIMEBOW, эти красители можно различить, превратив изображение с двумя каналами записи в четырехцветное изображение. Для достижения сверхразрешения использовался только один STED-лазер с длиной волны 775 нм. Все используемые красители производятся компанией abberior.
TIMEBOW + MATRIX – идеальное сочетание для непревзойденных результатов
TIMEBOW можно комбинировать с матричным детектором MATRIX от abbeior. Эта комбинация дает вам более высокое соотношение сигнал/фон, лучшее разрешение и впечатляющий динамический диапазон. Каждый из более чем двадцати сенсорных элементов MATRIX используется для одновременной регистрации как информации о времени жизни, так и информации о происхождении фотонов относительно фокальной плоскости. С помощью этих данных мы избавляемся от фона лучше, чем это когда-либо смог бы сделать пинхол конфокальной системы, и делаем потрясающие изображения не только более информативными, но и с исключительной контрастностью.
TIMEBOW используется не только для измерения времени жизни флуоресценции, но также может использоваться для повышения разрешения STED. Это связано с тем, что флуорофоры, расположенные далеко от центра кольцевого пучка лазера, имеют более высокие мощности STED и, следовательно, более короткое время жизни. Другими словами, время жизни кодирует дополнительную пространственную информацию. Его использование эффективно увеличивает разрешение изображения.
TIMEBOW STED (слева) vs MATRIX + TIMEBOW STED (справа)
Актин в микроворсинках клеток CaCo2, зарегистрированный с помощью FACILITY. Фиксированные клетки окрашивали фаллоидином abberior STAR RED. Изображение образца с интенсивным фоном оптимизировано с помощью детектирования с MATRIX путем прямого вычитания несфокусированных данных. Для повышения разрешения используется TIMEBOW, поддерживающий низкую мощность лазера STED. Информация о времени позволяет выборочно исключить эмиссию, связанную с STED. Образец предоставил профессор Дороти Гюнцель и Йорга Пионтека (Charité, Берлин, Германия).