Световой "лист" создается из одного объектива и изображение получается с использованием другого объектива. Световой "лист" перемещается через образец, чаще всего путем перемещения светового листа с помощью гальванического сканера, который синхронизирован с пьезоэлектрической подвижкой, перемещающей объектив регистрации изображения.
Преимущества: быстрое получение изображения, наименее дорогая и простая в использовании установка.
Недостатки: Разрешение по латеральной оси XY лучше, чем разрешение по аксиальной оси Z.
Двусторонние системы (diSPIM)
Обе стороны diSPIM установки имеют сканер световых "листов", пьезоэлектрический позиционер и камеру. Во время эксперимента стопка изображений собирается из обоих объективов, и два набора данных могут быть объединены при вычислениях для получения трехмерного набора данных с изотропным разрешением (обычная проблема плохого аксиального разрешения преодолевается информацией из другого места обзора). При желании может работать в одностороннем режиме iSPIM.
Преимущества: все разрешения по латеральной оси XY и аксиальной оси Z очень хорошие, что дает сочетание высокой скорости и разрешения, непревзойденную для визуализации живых клеток.
Недостатки: дорогостоящее оборудование для покупки, постобработка данных необходима для изотропного разрешения.
Вариации в системах SPIM
- Колесо с фильтрами на пути визуализации;
- Асимметричная односторонняя система, например, используя те же объективы, что для светового листа с дискретным освещением;
- Негауссов пучок;
- 2-фотонная микроскопия.