Слайд-камера ibidi μ-Slide I Luer 3D - это универсальный слайд для огромного количества применений с культурами клеток с использованием трехмерной гелевой матрицы и напряжения сдвига:
- Создание клеточного монослоя на гелевой матрице - исследование потенциальных поляризационных эффектов;
- Культивирование клеток или кластеров клеток внутри гелевой матрицы;
- Проведение анализов с использованием различных гелевых матриц с различной концентрацией, жесткостью или химическим составом.
|
Сшитое изображение клеток HUVEC в лунках µ-Slide I Luer 3D на геле Collagen Type I. Клетки культивировали при определенном напряжении сдвига 10 дин/см2 в течение 5 дней. Фазово-контрастная микроскопия, объектив 4x.
|
μ-Slide I Luer 3D подходит для широкого спектра приложений для культивирования клеток. Три лунки могут быть заполнены разными гелевыми матриксами или разными концентрациями. Клетки можно культивировать в виде монослоя поверх геля. В качестве альтернативы в гель можно встроить отдельные клетки или кластеры клеток. Комбинация с проточным каналом обеспечивает определенное напряжение сдвига на монослое гелевой матрицы. Если клетки встроены в гелевую матрицу, перфузия доставляет им кислород и питательные вещества.
Процедура заполнения слайд-камеры μ-Slide I Luer 3D
Протестированные применения
Эти приложения были протестированы командой разработчиков ibidi или пользователями лабораторной посуды ibidi.
Эндотелиальные барьеры без искусственной мембраны
Слайд-камеры µ-Slide I Luer 3D ibidi позволяют создавать эндотелиальный барьер без искусственной фильтрующей мембраны. Эндотелиальные клетки можно засеять на подходящую гелевую матрицу, такую как Collagen Type I. После подсоединения камеры к насосу и приложения определенного напряжения сдвига создаются условия, подобные in vivo. Данная модель моделирует кровеносные сосуды на мягкой матрице ECM вместо использования жесткой фильтрующей мембраны. Прочтите инструкцию по применению ibidi, чтобы узнать о конкретном протоколе для HUVEC с Collagen Type I и системой накачки ibidi.
Культура клеток на физиологической гелевой матрице в µ-Slide I Luer 3D ibidi
|
Культура клеток на мембране без физиологической гелевой матрицы
|
|
|
|
Фазово-контрастная микроскопия HUVEC после их культивирования в потоке при 10 дин/см² в течение 2 дней (слева) и 5 дней (справа) на Collagen Type I (2 мг/мл). Обратите внимание на морфологию клеток, похожую на гальку, после 5 дней культивирования в потоке. Объектив с 20-кратным увеличением.
|
Флуоресцентная микроскопия HUVEC после их культивирования в потоке при 10 дин/см² в течение 5 дней. Объектив: 10x.
|
Поляризация клеток
Монослой клеток засевают на гидрогеле, и можно приложить определенное напряжение сдвига. Будучи совместимым со всеми гелевыми матрицами, которые можно использовать с пипеткой µ-Slide I Luer 3D ibidi позволяет проводить широкий спектр поляризационных исследований (например, с эпителиальными клетками).
Поляризованные клетки на гелевой матрице, культивируемые при определенном напряжении сдвига
Возможные варианты использования
Следующие ниже примеры иллюстрируют потенциальное использование продукта. Компания ibidi еще не тестировала эти приложения собственными силами, поэтому мы не можем предоставить конкретные протоколы. Однако с технической точки зрения эти приложения возможны.
Исследования тканей и клеток в 3D условиях
С помощью µ-Slide I Luer 3D ibidi можно провести несколько экспериментов с клеточной культурой в 3D. Например, отдельные клетки или кластеры клеток можно засеять в матрицу гидрогеля. Дополнительно: определенное напряжение сдвига может быть приложено к верхнему монослою клеток.
Сфероиды (слева) или отдельные клетки (справа), встроенные в трехмерную гелевую матрицу
Исследование роллинга (качения), адгезии и трансмиграции
Для физиологического роллинга (качения), адгезии и трансмиграции слой эндотелиальных клеток может быть снабжен суспензионными клетками на внутренней стороне и раковыми клетками-мишенями на нижней стороне. Дополнительно может быть приложено определенное напряжение сдвига.
Совместное культивирование слоя эндотелиальных клеток и суспензионных клеток для анализов роллинга и адгезии (слева), с дополнительными раковыми клетками-мишенями (опция) внутри внеклеточного матрикса (справа).