Визуализация динамики актина в хемотаксическом градиенте на живых клетках
Сети F-актина играют важную роль во время миграции клеток, которую можно детально исследовать с помощью хемотаксических градиентов. Первичные дендритные клетки выделяли от мышей и трансфицировали плазмидой LifeAct. Для анализа хемотаксиса клетки высевали на слайде для хемотаксиса и применяли хемотаксический градиент (CCL19). Через день после трансфекции динамику F-актина в мигрирующих клетках визуализировали с помощью визуализации живых клеток.
Хемотаксис лейкоцитов в 3D
Быстрые лейкоциты, такие как дендритные клетки или Т-клетки, можно хорошо визуализировать во время хемотаксиса, когда они находятся внутри гелевых матриц, таких как коллаген. Особенно при использовании флуоресцентной микроскопии с высоким разрешением, которая показывает изменения в цитоскелете во время иммунного ответа и трехмерной интерстициальной миграции.
Флуоресцентная микроскопия хемотаксических дендритных клеток мышей. Цитоскелет визуализируется с помощью LifeAct.
Ингибирование хемотаксиса в эндотелиальных клетках (HUVEC)
Эндотелиальные клетки образуют кончик копья, когда кровеносные сосуды образуются во время развития опухоли. Блокирование этого механизма, управляемого хемотаксисом, является одной из ключевых целей антиангиогенных терапевтических подходов. С помощью слайда для хемотаксиса эндотелиальные клетки могут подвергаться воздействию соединений, которые ингибируют функциональность хемотаксиса.
Ротмайер А.С. и др. (2009) Исследование морского соединения спонгистатина 1 связывает ингибирование транслокации PKCα с немитотическими эффектами антагонизма тубулина в ангиогенезе. FASEB J 23 (4): 1127–1137. 10.1096 / fj.08-117127.
Различение хемотаксиса и хемокинеза в раковых клетках
Хемотаксис, описываемый как направленное движение к хемоаттрактанту, можно отличить от хемокинеза, который известен как усиленный эффект миграции. Слайд для хемотаксиса позволяет анализировать оба эффекта независимо друг от друга (в отличие от тестов с трансвелл). В примере выбранный хемоаттрактант индуцирует как хемотаксис, так и хемокинез раковых клеток.
Хемотаксис от клетки к клетке
Слайд-камера ibidi для хемотаксиса может дополнительно использоваться для анализов хемотаксиса от клетки к клетке. Например, клетки, внесенные внутрь больших резервуаров, можно использовать в качестве продуцента хемоаттрактанта. В примере, показанном на рисунке (Zengel et al., 2011), клеточная линия FaDu была выбрана в качестве возможного источника хемоаттрактанта. Эндотелиальные клетки (HUVEC) были протестированы на их хемотаксический ответ. HUVEC демонстрируют аналогичный эффект хемотаксиса в направлении клеток FaDu, который сопоставим с эффектом хемотаксиса в отношении 10% фетальной телячьей сыворотки в качестве хемоаттрактанта.