Арт. RECIRCULATION PACK
Перфузионные камеры
|
|
В настоящее время доступен широкий выбор перфузионных камер, от простого герметичного покровного стекла на стекле микроскопа до сложных перфузионных камер, позволяющих полностью контролировать среду, в которой находятся клетки. В последнее время развитие микрофлюидики привело к разработке интегрированной системы культивирования клеток. Камеры перфузии являются критическим аспектом визуализации живых клеток, они должны удовлетворять двум одинаково важным требованиям: поддерживать клетки в здоровом состоянии и позволять наблюдать за живыми клетками с максимально возможным разрешением. |
Закрытые перфузионные камеры
|
|
Доступны две основные категории камер для содержания культуры клеток. Первая категория - это открытые камеры. Они просты и очень похожи на чашки Петри. В открытых камерах среда, окружающая клетки, медленно приближается к равновесию с окружающей атмосферой во время эксперимента. Такие камеры позволяют легко получить доступ к клеткам, но практически не позволяют контролировать среду. Закрытые камеры герметичны и поэтому обеспечивают полный контроль над параметрами окружающей среды, такими как температура, pH, концентрация углекислого газа, а питательная среда не испаряется. Большинство закрытых камер |
Слайды микроскопа для культивирования клеток
Для краткосрочных экспериментов слайд можно прикрепить к предметному стеклу микроскопа. Для более длительных экспериментов можно использовать более сложные слайды, имеющие входной и выходной каналы и позволяющие освежить питательную среду или вводить медикаменты во время эксперимента. Такие слайды с культурами клеток часто имеют несколько камер для мультиплексирования экспериментов.
Слайды также можно использовать с нагревателями, такими как модули Пельтье или воздуходувки, для экспериментов в течение более длительных периодов времени. Для более сложных экспериментов обычно предпочтительны закрытые перфузионные камеры.
Размеры камеры. Глубина перфузионной камеры должна быть минимальной, чтобы получить максимально возможное оптическое качество проходящего света. Что касается площади покровного стекла, большие области обзора более чувствительны к утечкам и физическим повреждениям, но позволяют использовать объективы с высокой числовой апертурой.
Характеристики потока. Для экспериментов, включающих добавление в культуру клеток других агентов, таких как медикаметы или факторы роста, очень важно получить ламинарный поток, обеспечивающий контролируемый перенос среды. Чтобы поддерживать ламинарный поток внутри камеры, поперечное сечение камеры должно быть очень близким к поперечному сечению входной трубки. Доступно несколько методов доставки жидкостей, но следует также учитывать однородность потока, поскольку гидродинамические импульсы могут повредить клетки или выгнуть покровное стекло.
Контроль температуры. Для длительных экспериментов необходимо обеспечить контроль температуры среды, окружающей клетку. Многие системы включают нагревательные элементы, соединенные с камерой. Однако некоторые части микроскопа, такие как рамка и объективы, могут действовать как теплоотвод и нарушать термостабильность перфузионной камеры. Более того, небольшие изменения температуры окружающей среды могут привести к тепловому расширению или сжатию в какой-либо части микроскопа, изменяя фокусную плоскость. Для жесткого контроля температуры микроскопа доступны такие системы, как нагреватели объективов или инкубатор.
Микрожидкостные чипы
Микрофлюидика в настоящее время является растущей и многообещающей областью биологии. Она позволяет в высокой степени контролировать среду клеток, динамику потока и совместима с существующими микроскопами высокого разрешения. В настоящее время в этой области проводится множество исследований, и простые микрожидкостные микросхемы уже коммерчески доступны. Из-за универсальности процессов микротехнологии исследователи разработали множество микрожидкостных лабораторий для широкого спектра применений, от простых экспериментов с воздействием напряжения до сложных органов на чипе.
