Методы микроскопии: конфокальная, широкопольная микроскопия, микроскопия в проходящем свете и деконволюция - azimp-micro.ru
azimp-micro.ru
Ваш ориентир в Микроскопии
Ru En
8 (800) 551-20-97
+7 (495) 792-39-88
+7 (812) 407-10-47
Пн. – Пт.: с 9:30 до 18:00
Заказать звонок
Москва, Шаболовка, 10 info@azimp-micro.ru
Компания
  • О компании
  • Сертификаты
  • Поставщики
  • Вакансии
  • Клиенты
  • Реквизиты
Каталог
  • Микроскопы
    Микроскопы
    • Новые микроскопы
    • Б. у. микроскопы
    • Портативные микроскопы
    • Модульные микроскопы
    • Специализированные микроскопы
    • Делители изображений
  • Системы визуализации
    Системы визуализации
    • Конфокальные микроскопы
    • Мультифотонные микроскопы
    • Модульные микроскопы
    • Гиперспектральный анализ и КР спектроскопия
    • Микроскопы сверхвысокого разрешения
    • Контроль качества
    • Системы для ОКТ
  • Модификация микроскопов
    Модификация микроскопов
    • 3D микроскопия
    • FLIM микроскопия
    • STED микроскопия
    • Конфокальная микроскопия
    • Микроскопия плоскостного освещения
    • Системы локализованного освещения
    • Автоматизация микроскопа
  • Аксессуары для микроскопов
    Аксессуары для микроскопов
    • Столики для микроскопов
    • Моторизация микроскопа
    • Микроскопия живых клеток
    • Оборудование для ИКСИ
    • Адаптеры для микроскопов
    • Делители изображений
    • Колеса для фильтров
    • Расходные материалы
    • Контроль качества
  • Микрофлюидика
    Микрофлюидика
    • Системы управления потоком
    • Микроскопы
    • Системы измерения
    • Дополнительное оборудование
    • Готовые наборы
    • Контроль температуры
    • Оборудование для инжекции
    • Микрофлюидные чипы
    • 3D биопринтеры
    • Программное обеспечение
  • Электрофизиология
    Электрофизиология
    • Готовые системы
    • Манипуляторы
    • Оборудование для микроинъекций
    • Оборудование для патч-кламп
    • Пуллеры и микрокузницы
    • Системы визуализации
    • Системы сбора и обработки данных
    • Системы усиления
    • Стимуляторы
    • Физиология мышц
    • Комплектующие
    • Ещё
  • Исследования на животных
    Исследования на животных
    • In vivo визуализация и стимуляция
    • Структурированное освещение
    • Анестезия животных
    • Нейрофизиология
    • Оборудование для стереотаксиса
    • Хирургические инструменты
    • Комплектующие
  • Лабораторные принадлежности
    Лабораторные принадлежности
    • Чашки Петри
    • Слайд-камеры
    • Посуда с биоинертной поверхностью
    • Съемные силиконовые лунки
    • Культуральные вставки
    • Многолуночные планшеты
    • Посуда с сеткой на дне
    • Предметные и покровные стекла
    • Программное обеспечение
  • Аналитическое оборудование
    Аналитическое оборудование
    • Для изучения биологических объектов и сред
    • Для молекулярной и клеточной биологии
    • Пробоподготовка
    • Фотохимия
    • Хроматография
  • FLIM микроскопия
    FLIM микроскопия
    • TCSPC модули
    • FLIM системы
    • Детекторы счета фотонов
    • Пикосекундные лазеры
    • Программное обеспечение
  • Источники излучения
    Источники излучения
    • Многоволновые лазеры
    • Пикосекундные лазеры
    • Фемтосекундные лазеры
    • Ламповые источники
    • Светодиодные источники
    • Системы локализованного освещения
    • Жидкостные световоды и аксессуары
  • Научные камеры
    Научные камеры
    • CCD камеры
    • EMCCD камеры
    • HDMI камеры
    • sCMOS камеры
    • CMOS камеры
    • Делители изображений
  • Реагенты и реактивы
    Реагенты и реактивы
    • Красители для STED
    • Мечение и зонды
  • Каталог Edmund Optics
    Каталог Edmund Optics
    • Микроскопы
    • Объективы для микроскопов
    • Фильтры для микроскопии
    • Оптомеханика
    • Оптика для передачи изображения
    • Тест-объекты для микроскопов
    • Камеры
    • Окуляры
    • Увеличительные стекла
Основы микроскопии
  • Конфокальная микроскопия
    • Лазерная сканирующая микроскопия
    • Основные принципы метода
  • Мультифотонная микроскопия
    • Основы мультифотонной микроскопии
    • Лазерная сканирующая микроскопия
  • Общие принципы
    • Основные характеристики и маркировка объективов
    • Освещение по Келеру
    • Влияние конденсора микроскопа на разрешение изображения
    • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
  • Флуоресцентная микроскопия
    • Микроскопия плоскостного освещения
    • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
  • Оптогенетика
    • Оптогенетическая стимуляция
    • Кальциевая визуализация in vivo
Проекты
  • Микроскопия
  • Оптогенетика
  • Спектроскопия
Вебинары
  • Вебинары Abberior Instruments
    • STED микроскопия живых клеток
    • STED PAINT микроскопия
    • Адаптивная оптика в STED микроскопии
    • "Микроскоп MINFLUX - революция в флуоресцентной микроскопии" - вебинар Нобелевского лауреата
    • Демонстрация и принцип работы модуля STEDYCON
  • Вебинары Andor
    • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 2
    • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 1
    • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах sCMOS
    • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах EMCCD
    • Чувствительность sCMOS камер Andor с задней подсветкой для микроскопии
  • Вебинары Becker&Hickl
    • Метаболическая визуализация: одновременная регистрация FLIM изображений NAD(P)H и FAD
    • Оптимизация визуализации, аппроксамация и анализ автофлуоресцентных NAD(P)H и FAD
    • Исследование метаболизма в живых клетках рака предстательной железы: двухфотонная FLIRR микроскопия
    • Руководство для чайников по FLIM / FRET
    • Отслеживание концентрации кислорода методом гашения фосфоренценции
    • ПО SPCImage NG: извлечение информации из FLIM данных
  • Вебинары Confocal.nl
    • Микроскопия сверхвысокого разрешения при слабой мощности излучения
    • Принцип работы оптического модуля RCM для конфокальной микроскопии
    • Преодоление ограничений оптической микроскопии с помощью модуля RCM
    • Визуализация живых клеток с помощью инкубаторов Tokai Hit и модуля RCM
    • Оптический модуль RCM для конфокальной микроскопии и ПО Volocity
    • Получение разрешения 120 нм на RCM с ПО Microvolution
    • Детекторы совместимые с RCM модулем для конфокальной микроскопии
  • Вебинары Double Helix Optics
    • Технология фазовых масок Double Helix для исследования полимерных структур
    • Обзор технологии 3D визуализации Double Helix
    • Отслеживание траекторий одиночных молекул в 3D с помощью технологии Double Helix
  • Вебинары Elveflow
    • Как собрать набор для рециркуляции от Elveflow?
    • Поток и рециркуляция среды в культуре клеток на микрофлюидном чипе
  • Вебинары Thorlabs
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 4
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 3
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 2
    • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 1
    • Как выбрать лазерный источник и оптику для мультифотонного микроскопа
    • Как правильно подобрать камеру для микроскопа
Условия работы
  • Оформление заказа
  • Оплата заказа
  • Доставка
  • Наши преимущества
  • Услуги
Информация
  • Новости
  • Статьи
  • Вопрос ответ
  • Обзоры
  • Мероприятия
Контакты
    azimp-micro.ru
    Компания
    • О компании
    • Сертификаты
    • Поставщики
    • Вакансии
    • Клиенты
    • Реквизиты
    Каталог
    • Микроскопы
      Микроскопы
      • Новые микроскопы
      • Б. у. микроскопы
      • Портативные микроскопы
      • Модульные микроскопы
      • Специализированные микроскопы
      • Делители изображений
    • Системы визуализации
      Системы визуализации
      • Конфокальные микроскопы
      • Мультифотонные микроскопы
      • Модульные микроскопы
      • Гиперспектральный анализ и КР спектроскопия
      • Микроскопы сверхвысокого разрешения
      • Контроль качества
      • Системы для ОКТ
    • Модификация микроскопов
      Модификация микроскопов
      • 3D микроскопия
      • FLIM микроскопия
      • STED микроскопия
      • Конфокальная микроскопия
      • Микроскопия плоскостного освещения
      • Системы локализованного освещения
      • Автоматизация микроскопа
    • Аксессуары для микроскопов
      Аксессуары для микроскопов
      • Столики для микроскопов
      • Моторизация микроскопа
      • Микроскопия живых клеток
      • Оборудование для ИКСИ
      • Адаптеры для микроскопов
      • Делители изображений
      • Колеса для фильтров
      • Расходные материалы
      • Контроль качества
    • Микрофлюидика
      Микрофлюидика
      • Системы управления потоком
      • Микроскопы
      • Системы измерения
      • Дополнительное оборудование
      • Готовые наборы
      • Контроль температуры
      • Оборудование для инжекции
      • Микрофлюидные чипы
      • 3D биопринтеры
      • Программное обеспечение
    • Электрофизиология
      Электрофизиология
      • Готовые системы
      • Манипуляторы
      • Оборудование для микроинъекций
      • Оборудование для патч-кламп
      • Пуллеры и микрокузницы
      • Системы визуализации
      • Системы сбора и обработки данных
      • Системы усиления
      • Стимуляторы
      • Физиология мышц
      • Комплектующие
      • Ещё
    • Исследования на животных
      Исследования на животных
      • In vivo визуализация и стимуляция
      • Структурированное освещение
      • Анестезия животных
      • Нейрофизиология
      • Оборудование для стереотаксиса
      • Хирургические инструменты
      • Комплектующие
    • Лабораторные принадлежности
      Лабораторные принадлежности
      • Чашки Петри
      • Слайд-камеры
      • Посуда с биоинертной поверхностью
      • Съемные силиконовые лунки
      • Культуральные вставки
      • Многолуночные планшеты
      • Посуда с сеткой на дне
      • Предметные и покровные стекла
      • Программное обеспечение
    • Аналитическое оборудование
      Аналитическое оборудование
      • Для изучения биологических объектов и сред
      • Для молекулярной и клеточной биологии
      • Пробоподготовка
      • Фотохимия
      • Хроматография
    • FLIM микроскопия
      FLIM микроскопия
      • TCSPC модули
      • FLIM системы
      • Детекторы счета фотонов
      • Пикосекундные лазеры
      • Программное обеспечение
    • Источники излучения
      Источники излучения
      • Многоволновые лазеры
      • Пикосекундные лазеры
      • Фемтосекундные лазеры
      • Ламповые источники
      • Светодиодные источники
      • Системы локализованного освещения
      • Жидкостные световоды и аксессуары
    • Научные камеры
      Научные камеры
      • CCD камеры
      • EMCCD камеры
      • HDMI камеры
      • sCMOS камеры
      • CMOS камеры
      • Делители изображений
    • Реагенты и реактивы
      Реагенты и реактивы
      • Красители для STED
      • Мечение и зонды
    • Каталог Edmund Optics
      Каталог Edmund Optics
      • Микроскопы
      • Объективы для микроскопов
      • Фильтры для микроскопии
      • Оптомеханика
      • Оптика для передачи изображения
      • Тест-объекты для микроскопов
      • Камеры
      • Окуляры
      • Увеличительные стекла
    Основы микроскопии
    • Конфокальная микроскопия
      • Лазерная сканирующая микроскопия
      • Основные принципы метода
    • Мультифотонная микроскопия
      • Основы мультифотонной микроскопии
      • Лазерная сканирующая микроскопия
    • Общие принципы
      • Основные характеристики и маркировка объективов
      • Освещение по Келеру
      • Влияние конденсора микроскопа на разрешение изображения
      • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
    • Флуоресцентная микроскопия
      • Микроскопия плоскостного освещения
      • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
    • Оптогенетика
      • Оптогенетическая стимуляция
      • Кальциевая визуализация in vivo
    Проекты
    • Микроскопия
    • Оптогенетика
    • Спектроскопия
    Вебинары
    • Вебинары Abberior Instruments
      • STED микроскопия живых клеток
      • STED PAINT микроскопия
      • Адаптивная оптика в STED микроскопии
      • "Микроскоп MINFLUX - революция в флуоресцентной микроскопии" - вебинар Нобелевского лауреата
      • Демонстрация и принцип работы модуля STEDYCON
    • Вебинары Andor
      • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 2
      • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 1
      • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах sCMOS
      • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах EMCCD
      • Чувствительность sCMOS камер Andor с задней подсветкой для микроскопии
    • Вебинары Becker&Hickl
      • Метаболическая визуализация: одновременная регистрация FLIM изображений NAD(P)H и FAD
      • Оптимизация визуализации, аппроксамация и анализ автофлуоресцентных NAD(P)H и FAD
      • Исследование метаболизма в живых клетках рака предстательной железы: двухфотонная FLIRR микроскопия
      • Руководство для чайников по FLIM / FRET
      • Отслеживание концентрации кислорода методом гашения фосфоренценции
      • ПО SPCImage NG: извлечение информации из FLIM данных
    • Вебинары Confocal.nl
      • Микроскопия сверхвысокого разрешения при слабой мощности излучения
      • Принцип работы оптического модуля RCM для конфокальной микроскопии
      • Преодоление ограничений оптической микроскопии с помощью модуля RCM
      • Визуализация живых клеток с помощью инкубаторов Tokai Hit и модуля RCM
      • Оптический модуль RCM для конфокальной микроскопии и ПО Volocity
      • Получение разрешения 120 нм на RCM с ПО Microvolution
      • Детекторы совместимые с RCM модулем для конфокальной микроскопии
    • Вебинары Double Helix Optics
      • Технология фазовых масок Double Helix для исследования полимерных структур
      • Обзор технологии 3D визуализации Double Helix
      • Отслеживание траекторий одиночных молекул в 3D с помощью технологии Double Helix
    • Вебинары Elveflow
      • Как собрать набор для рециркуляции от Elveflow?
      • Поток и рециркуляция среды в культуре клеток на микрофлюидном чипе
    • Вебинары Thorlabs
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 4
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 3
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 2
      • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 1
      • Как выбрать лазерный источник и оптику для мультифотонного микроскопа
      • Как правильно подобрать камеру для микроскопа
    Условия работы
    • Оформление заказа
    • Оплата заказа
    • Доставка
    • Наши преимущества
    • Услуги
    Информация
    • Новости
    • Статьи
    • Вопрос ответ
    • Обзоры
    • Мероприятия
    Контакты
      azimp-micro.ru
      0
      • Компания
        • Назад
        • Компания
        • О компании
        • Сертификаты
        • Поставщики
        • Вакансии
        • Клиенты
        • Реквизиты
      • Каталог
        • Назад
        • Каталог
        • Микроскопы
          • Назад
          • Микроскопы
          • Новые микроскопы
            • Назад
            • Новые микроскопы
            • Биологические микроскопы
            • Флуоресцентные микроскопы
            • Аксессуары для микроскопов
            • Стереомикроскопы
            • Поляризационные микроскопы
            • Металлографические и промышленные микроскопы
          • Б. у. микроскопы
            • Назад
            • Б. у. микроскопы
            • Б. у. микроскопы Leica
            • Б. у. микроскопы Nikon
            • Б. у. микроскопы Olympus
            • Б. у. микроскопы Zeiss
            • Б. у. объективы
          • Портативные микроскопы
          • Модульные микроскопы
          • Специализированные микроскопы
          • Делители изображений
        • Системы визуализации
          • Назад
          • Системы визуализации
          • Конфокальные микроскопы
          • Мультифотонные микроскопы
          • Модульные микроскопы
          • Гиперспектральный анализ и КР спектроскопия
          • Микроскопы сверхвысокого разрешения
            • Назад
            • Микроскопы сверхвысокого разрешения
            • Микроскопы
            • Дополнительные модули
          • Контроль качества
          • Системы для ОКТ
        • Модификация микроскопов
          • Назад
          • Модификация микроскопов
          • 3D микроскопия
          • FLIM микроскопия
          • STED микроскопия
          • Конфокальная микроскопия
            • Назад
            • Конфокальная микроскопия
            • Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия
            • Конфокальная микроскопия с вращающимся диском
          • Микроскопия плоскостного освещения
          • Системы локализованного освещения
          • Автоматизация микроскопа
        • Аксессуары для микроскопов
          • Назад
          • Аксессуары для микроскопов
          • Столики для микроскопов
            • Назад
            • Столики для микроскопов
            • Моторизированные столики
            • Столики с нагревом и охлаждением
          • Моторизация микроскопа
            • Назад
            • Моторизация микроскопа
            • Моторизированные столики
            • Системы фокусировки
            • Системы загрузки предметных стекол
            • Джойстики
            • Контроллеры
            • Система автоматизации микроскопа
          • Микроскопия живых клеток
            • Назад
            • Микроскопия живых клеток
            • Нагревательные столики
            • Инкубаторы
            • Газовые контроллеры
            • Оборудование для ИКСИ
            • Системы для перфузии
          • Оборудование для ИКСИ
          • Адаптеры для микроскопов
          • Делители изображений
          • Колеса для фильтров
          • Расходные материалы
            • Назад
            • Расходные материалы
            • Стекла для микроскопа
            • Флуоресцентные красители
            • Наборы для калибровки
          • Контроль качества
            • Назад
            • Контроль качества
            • Предметные стекла Abberior
            • Предметные стекла Argolight
            • Флуоресцентные тестеры GATTAquant
        • Микрофлюидика
          • Назад
          • Микрофлюидика
          • Системы управления потоком
          • Микроскопы
          • Системы измерения
          • Дополнительное оборудование
          • Готовые наборы
          • Контроль температуры
          • Оборудование для инжекции
            • Назад
            • Оборудование для инжекции
            • Готовые системы
            • Шприцевые насосы
            • Перистальтические насосы
          • Микрофлюидные чипы
            • Назад
            • Микрофлюидные чипы
            • Микрофлюидные чипы из полимеров
            • Микрофлюидные чипы из стекла
            • Органы на чипах
            • Изготовление чипов
          • 3D биопринтеры
            • Назад
            • 3D биопринтеры
            • 3D биопринтеры
            • Компоненты для биопечати
          • Программное обеспечение
        • Электрофизиология
          • Назад
          • Электрофизиология
          • Готовые системы
          • Манипуляторы
          • Оборудование для микроинъекций
          • Оборудование для патч-кламп
            • Назад
            • Оборудование для патч-кламп
            • Автоматизированные системы
            • Системы на искусственных мембpанах
            • Усилители для patch-clamp
          • Пуллеры и микрокузницы
          • Системы визуализации
            • Назад
            • Системы визуализации
            • Источники света
            • Микроскопы
            • Системы контроля освещения
          • Системы сбора и обработки данных
          • Системы усиления
          • Стимуляторы
          • Физиология мышц
          • Комплектующие
            • Назад
            • Комплектующие
            • Источники света и контроллеры
            • Оптические разветвители
            • Камера
            • Вращающиеся соединения
            • Волоконная фотометрия
            • Канюли
            • Миниатюрные микроскопы
            • Патч-корды
            • Столы и стойки
            • Электрофизиология
            • Аксессуары
        • Исследования на животных
          • Назад
          • Исследования на животных
          • In vivo визуализация и стимуляция
          • Структурированное освещение
          • Анестезия животных
            • Назад
            • Анестезия животных
            • Многофункциональные решения
            • Аппараты для анестезии
            • Аппараты ИВЛ
            • Аксессуары
            • Системы мониторинга
          • Нейрофизиология
          • Оборудование для стереотаксиса
            • Назад
            • Оборудование для стереотаксиса
            • Стереотаксис крыс
            • Стереотаксис мышей
            • Стереотаксис мышей и крыс
            • Стереотаксис крупных животных
            • Оборудование для микроинъекций
            • Аксессуары для систем стереотаксиса
          • Хирургические инструменты
            • Назад
            • Хирургические инструменты
            • Хирургические наборы для небольших животных
            • Наборы для ветеринарии
          • Комплектующие
            • Назад
            • Комплектующие
            • Источники света и контроллеры
            • Оптические разветвители
            • Камера
            • Вращающиеся соединения
            • Волоконная фотометрия
            • Канюли
            • Миниатюрные микроскопы
            • Оптогенетика
            • Патч-корды
            • Электрофизиология
            • Аксессуары
        • Лабораторные принадлежности
          • Назад
          • Лабораторные принадлежности
          • Чашки Петри
          • Слайд-камеры
            • Назад
            • Слайд-камеры
            • Камеры на покровных стеклах
            • Камеры на предметных стеклах
            • Слайд-камеры с каналами
            • Слайд-камеры с клейким основанием
            • Со структурированной поверхностью
            • Аксессуары для слайд-камер
          • Посуда с биоинертной поверхностью
          • Съемные силиконовые лунки
          • Культуральные вставки
          • Многолуночные планшеты
          • Посуда с сеткой на дне
          • Предметные и покровные стекла
          • Программное обеспечение
        • Аналитическое оборудование
          • Назад
          • Аналитическое оборудование
          • Для изучения биологических объектов и сред
            • Назад
            • Для изучения биологических объектов и сред
            • Изучение газообмена
            • Изучение фотосинтеза
            • Системы контроля среды
            • Системы фенотипирования
          • Для молекулярной и клеточной биологии
            • Назад
            • Для молекулярной и клеточной биологии
            • Гомогенизаторы высокого давления
            • Оборудование для работы с клетками
            • Холодильное оборудование
          • Пробоподготовка
            • Назад
            • Пробоподготовка
            • Материаловедение
            • Микротомы
            • Системы упаривания
            • Электронная микроскопия
          • Фотохимия
          • Хроматография
        • FLIM микроскопия
          • Назад
          • FLIM микроскопия
          • TCSPC модули
            • Назад
            • TCSPC модули
            • TCSPC платы
            • Автономные TCSPC системы
          • FLIM системы
          • Детекторы счета фотонов
          • Пикосекундные лазеры
          • Программное обеспечение
        • Источники излучения
          • Назад
          • Источники излучения
          • Многоволновые лазеры
          • Пикосекундные лазеры
          • Фемтосекундные лазеры
          • Ламповые источники
          • Светодиодные источники
            • Назад
            • Светодиодные источники
            • Светодиодные источники CoolLED
            • Светодиодные источники Excelitas
            • Светодиодные источники YODN
            • Светодиодные источники MShot
            • Встраиваемые осветители
            • Специализированные светодиоды
          • Системы локализованного освещения
          • Жидкостные световоды и аксессуары
        • Научные камеры
          • Назад
          • Научные камеры
          • CCD камеры
            • Назад
            • CCD камеры
            • CCD камеры Andor
            • CCD камеры Lumenera
            • CCD камеры Photometrics
          • EMCCD камеры
          • HDMI камеры
          • sCMOS камеры
            • Назад
            • sCMOS камеры
            • sCMOS камеры Andor
            • sCMOS камеры MShot
            • sCMOS камеры Photometrics
            • sCMOS камеры Tucsen
          • CMOS камеры
            • Назад
            • CMOS камеры
            • CMOS камеры Lumenera
            • CMOS камеры MShot
            • CMOS камеры Thorlabs
            • CMOS камеры Tucsen
          • Делители изображений
        • Реагенты и реактивы
          • Назад
          • Реагенты и реактивы
          • Красители для STED
            • Назад
            • Красители для STED
            • Флуоресцентные красители CAGE
            • Флуоресцентные красители LIVE
            • Флуоресцентные красители STAR
            • Флуоресцентные красители FLIP
            • Флуоресцентные красители FLUX
          • Мечение и зонды
            • Назад
            • Мечение и зонды
            • Мечение ДНК/кДНК
            • Мечение РНК/кРНК
        • Каталог Edmund Optics
          • Назад
          • Каталог Edmund Optics
          • Микроскопы
            • Назад
            • Микроскопы
            • Инвертированные и стереомикроскопы
            • Компактные и прямые микроскопы
            • Микроскопы Mitutoyo
            • Микроскопы Olympus
          • Объективы для микроскопов
            • Назад
            • Объективы для микроскопов
            • Объективы Mitutoyo
            • Объективы Nikon
            • Объективы Olympus
            • Объективы TECHSPEC®
            • Отражающие объективы
            • Модульные Zoom системы
            • Объективы с конечным задним фокусным расстоянием
            • Объективы с коррекцией на бесконечность
          • Фильтры для микроскопии
            • Назад
            • Фильтры для микроскопии
            • Коротковолновые фильтры
            • Нейтральные фильтры
            • Полосовые фильтры
            • Флуоресцентные фильтры
            • Длинноволновые и дихроичные фильтры
            • Колеса фильтров, фильтры в кубе
          • Оптомеханика
            • Назад
            • Оптомеханика
            • Держатели оптики
            • Оптические столы и плиты
            • Стержни и держатели стержней
            • Системы позиционирования
          • Оптика для передачи изображения
          • Тест-объекты для микроскопов
          • Камеры
          • Окуляры
          • Увеличительные стекла
      • Основы микроскопии
        • Назад
        • Основы микроскопии
        • Конфокальная микроскопия
          • Назад
          • Конфокальная микроскопия
          • Лазерная сканирующая микроскопия
          • Основные принципы метода
        • Мультифотонная микроскопия
          • Назад
          • Мультифотонная микроскопия
          • Основы мультифотонной микроскопии
          • Лазерная сканирующая микроскопия
        • Общие принципы
          • Назад
          • Общие принципы
          • Основные характеристики и маркировка объективов
          • Освещение по Келеру
          • Влияние конденсора микроскопа на разрешение изображения
          • Расчет увеличения микроскопа и площади образца
        • Флуоресцентная микроскопия
          • Назад
          • Флуоресцентная микроскопия
          • Микроскопия плоскостного освещения
          • Фильтры для флуоресцентной микроскопии
        • Оптогенетика
          • Назад
          • Оптогенетика
          • Оптогенетическая стимуляция
            • Назад
            • Оптогенетическая стимуляция
            • Что такое оптогенетика?
            • Оборудование для оптогенетики
            • Выбор источника света для оптогенетики: светодиод или лазер
            • Оптогенетика широкого поля и оптогенетика клеточного разрешения
            • Cистемы для оптогенетики клеточного разрешения
          • Кальциевая визуализация in vivo
            • Назад
            • Кальциевая визуализация in vivo
            • Что такое визуализация кальция in vivo?
            • Базовое оборудование для визуализации кальция in vivo
            • Системы для визуализации кальция in vivo
            • Интеграция оптогенетики и визуализации кальция in vivo
      • Проекты
        • Назад
        • Проекты
        • Микроскопия
        • Оптогенетика
        • Спектроскопия
      • Вебинары
        • Назад
        • Вебинары
        • Вебинары Abberior Instruments
          • Назад
          • Вебинары Abberior Instruments
          • STED микроскопия живых клеток
          • STED PAINT микроскопия
          • Адаптивная оптика в STED микроскопии
          • "Микроскоп MINFLUX - революция в флуоресцентной микроскопии" - вебинар Нобелевского лауреата
          • Демонстрация и принцип работы модуля STEDYCON
        • Вебинары Andor
          • Назад
          • Вебинары Andor
          • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 2
          • Демистификация научных камер: основные понятия и технологии - часть 1
          • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах sCMOS
          • Сохранение чувствительности при высокой скорости съемки в камерах EMCCD
          • Чувствительность sCMOS камер Andor с задней подсветкой для микроскопии
        • Вебинары Becker&Hickl
          • Назад
          • Вебинары Becker&Hickl
          • Метаболическая визуализация: одновременная регистрация FLIM изображений NAD(P)H и FAD
          • Оптимизация визуализации, аппроксамация и анализ автофлуоресцентных NAD(P)H и FAD
          • Исследование метаболизма в живых клетках рака предстательной железы: двухфотонная FLIRR микроскопия
          • Руководство для чайников по FLIM / FRET
          • Отслеживание концентрации кислорода методом гашения фосфоренценции
          • ПО SPCImage NG: извлечение информации из FLIM данных
        • Вебинары Confocal.nl
          • Назад
          • Вебинары Confocal.nl
          • Микроскопия сверхвысокого разрешения при слабой мощности излучения
          • Принцип работы оптического модуля RCM для конфокальной микроскопии
          • Преодоление ограничений оптической микроскопии с помощью модуля RCM
          • Визуализация живых клеток с помощью инкубаторов Tokai Hit и модуля RCM
          • Оптический модуль RCM для конфокальной микроскопии и ПО Volocity
          • Получение разрешения 120 нм на RCM с ПО Microvolution
          • Детекторы совместимые с RCM модулем для конфокальной микроскопии
        • Вебинары Double Helix Optics
          • Назад
          • Вебинары Double Helix Optics
          • Технология фазовых масок Double Helix для исследования полимерных структур
          • Обзор технологии 3D визуализации Double Helix
          • Отслеживание траекторий одиночных молекул в 3D с помощью технологии Double Helix
        • Вебинары Elveflow
          • Назад
          • Вебинары Elveflow
          • Как собрать набор для рециркуляции от Elveflow?
          • Поток и рециркуляция среды в культуре клеток на микрофлюидном чипе
        • Вебинары Thorlabs
          • Назад
          • Вебинары Thorlabs
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 4
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 3
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 2
          • Как собрать микроскоп с нуля. Часть 1
          • Как выбрать лазерный источник и оптику для мультифотонного микроскопа
          • Как правильно подобрать камеру для микроскопа
      • Условия работы
        • Назад
        • Условия работы
        • Оформление заказа
        • Оплата заказа
        • Доставка
        • Наши преимущества
        • Услуги
      • Информация
        • Назад
        • Информация
        • Новости
        • Статьи
        • Вопрос ответ
        • Обзоры
        • Мероприятия
      • Контакты
      • Мой кабинет
      • Корзина0
      • 8 (800) 551-20-97
        • Назад
        • Телефоны
        • 8 (800) 551-20-97
        • +7 (495) 792-39-88
        • +7 (812) 407-10-47
        • Заказать звонок
      Москва, Шаболовка, 10 info@azimp-micro.ru
      info@azimp-micro.ru
      • YouTube
      • Главная
      • Информация
      • Статьи
      • Методы микроскопии: конфокальная, широкопольная микроскопия, микроскопия в проходящем свете и деконволюция

      Методы микроскопии: конфокальная, широкопольная микроскопия, микроскопия в проходящем свете и деконволюция

      2 Марта 2022 13:43
      // Микроскопия
      В этой статье мы сосредоточимся на обзоре методов микроскопического исследования и последующего сбора данных, а также представим краткое описание системных решений Andor для микроскопии.

      Микроскопы являются важнейшим инструментом для современных приложений в области естественных наук: от медицинской диагностики (например, определение источника инфекции или степени тяжести опухоли) до анализа продуктов питания. При таком спросе неудивительно, что в последнее десятилетие произошел бум в развитии технологий микроскопии, позволяющих исследователям преодолевать дифракционный предел (предел Аббе) и получать более глубокое понимание сложных процессов. Однако простоту использования и доступность высококлассных технологий трудно найти в рамках одного продукта на рынке.

      С развитием систем микроскопии происходило одновременное развитие техники микроскопии. Первые методы микроскопии были основаны на микроскопии в проходящем свете. Дополнительные методы, которые очень ценны для современных специалистов по микроскопии, — это широкопольная флуоресцентная микроскопия и конфокальная микроскопия. Кроме того, восстановление и обработка изображений путем переназначения фотонов является существенным фактором при обработке изображений после их получения. Таким образом, программное обеспечение для деконволюции стало необходимым инструментом для обработки изображений после получения.

      Рисунок 1 - Конфокальный снимок Stentor pyriformis, полученный с помощью Andor Dragonfly. 253 оптических среза, снятых с помощью 40-кратного (1,1 NA) водного объектива с 40 мкм pinhole на Dragonfly

      Микроскопия в проходящем свете

      При микроскопии в проходящем свете свет проходит через образец, собственно поэтому метод так и назван. Самой простой техникой является светлопольная (метод светлого поля). Этот метод полезен для получения изображений толстых тканей или тканей, окрашенных гистологическими красителями, такими как гематоксилин и эозин, для обеспечения контрастности и детализации изображения. Однако яркое поле не идеально для визуализации более тонких и неокрашенных образцов. Проблема заключается в том, что структуры внутри клеток не создают достаточного контраста для визуализации нашими глазами. По этой причине были разработаны другие методы микроскопии в проходящем свете.

      Фазово-контрастная микроскопия использует кольца фазовых пластин в оптическом тракте, которые создают большую разницу фаз между структурами внутри образцов, что приводит к получению более контрастного изображения. Фазовый контраст является большим усовершенствованием микроскопии в проходящем свете, позволяя наблюдать структуру тонких неокрашенных образцов. Тем не менее, проблемой этой техники является генерируемый яркий ореол ("фазовый ореол"), который может скрыть детали.

      Другой метод микроскопии в проходящем свете, обеспечивающий высокий контраст и высокое разрешение, — это ДИК, где ДИК расшифровывается как дифференциальный интерференционный контраст; он имеет сложную и дорогую оптику. ДИК-метод основан на использовании двух поляризаторов: один помещается до попадания света на образец, а другой - после излучения света образцом. Лучи поляризованного света объединяются с небольшим сдвигом; этот сдвиг создает высокий контраст и высокое разрешение изображений в ДИК.

      Рисунок 2 - Получение изображений развития данио-рерио без пятен с использованием модальности визуализации DPC от BC43. Однопольное изображение живого эмбриона данио-рерио, полученное с помощью BC43 с использованием 10-кратного объектива (поле зрения 1,84 мм). Визуализация живого эмбриона от стадии купола (A) до 17 ч после оплодотворения (F). Эмбрионы на 50% (B) и 75% (C) эпиболии, 3- (D) (E) сомитной стадии. Изображение эмбриона данио-рерио было получено с помощью объектива 10X. Изображение представляет собой проекцию максимальной интенсивности 35 стеков, охватывающих весь диапазон 700 мкм, и снималось каждые 20 мин в течение 14 часов. Эмбрионы инкубировали при 28ºC.

      Недавней разработкой в микроскопии в проходящем свете является DPC - дифференциальный фазовый контраст (рис. 1). Компания Andor усовершенствовала DPC и внедрила его в новый настольный конфокальный микроскоп BC43 (подана заявка на патент).

      Принцип работы DPC заключается в том, что градиент фазы может быть извлечен из пары изображений интенсивности, полученных при противоположных углах освещения. Используя математический алгоритм для изображений DPC, можно получить метод количественной реконструкции фазы для дифференциальных фазово-контрастных изображений. (Tian L. & Waller L., 2015).

      DPC не требует:

      • специальные объективы (например, объективы для фазового контраста),
      • поляризационной оптики (как в ДИК),
      • и, его можно использовать для получения изображений образцов с двойным лучепреломлением (Tian L. et al., 2014).

      Кроме того, DPC обеспечивает постоянный доступ к образцу во всех областях, все время (не зависит от подстройки углов или регулировки поляризаторов). В отличие от ДИК, изображения DPC могут быть получены через пластиковую посуду, что практично и часто необходимо для многочисленных приложений биологической визуализации. DPC обеспечивает высокую контрастность и высокое разрешение изображений даже в неокрашенных тонких образцах.

      В заключение следует отметить, что DPC - это простой в использовании недорогой метод микроскопии в проходящем свете, позволяющий достичь больших углов освещения и избежать трудностей, связанных с механическим сканированием. Для микроскопии в проходящем свете DPC сочетает в себе лучшее из методов визуализации фазового контраста и ДИК. Поэтому DPC является превосходным методом визуализации без меток, имеющим очевидное применение в визуализации живых образцов.

      В микроскопах Andor Dragonfly и BC43 доступны технологии работы в проходящем свете. Новый настольный конфокальный микроскоп BC43 также выгодно отличается тем, что в него органично интегрирована система DPC. Пожалуйста, ознакомьтесь с информацией о BC43, чтобы получить полное представление об этой системе и ее технологиях микроскопии в проходящем свете.

      Широкопольная флуоресцентная микроскопия

      Широкопольная визуализация характеризуется полным освещением образца и последующим обнаружением всего излучаемого образцом света. С практической точки зрения, при широкопольной визуализации детектор улавливает свет в фокусе и свет вне фокуса.

      Широкопольная флуоресцентная микроскопия - это метод оптической микроскопии, который захватывает весь свет от образца (в фокусе и вне фокуса). Однако в основе широкопольной флуоресцентной микроскопии лежит физическое явление флуоресценции:

      Явление флуоресценции можно описать следующими шагами:

      • Молекула (или молекулярная система) поглощает свет определенной длины волны, т.е. длины волны возбуждения.
      • Возбужденный электрон "перепрыгивает" на более высокий энергетический уровень на атомных орбиталях.
      • Возбужденный электрон вернется в исходное энергетическое состояние и испустит фотон.
      • Испущенный фотон будет иметь большую длину волны (меньшую энергию), чем возбуждающий фотон, т.е. длину волны излучения.

      Флуоресценция представляет собой мгновенное явление и прекращает свое существование, как только возбуждающий свет выключается. Широкопольное освещение флуоресценции может быть достигнуто с помощью ртутных и ксеноновых ламповых, светодиодных источников света и, в последнее время, лазерного широкопольного освещения.

      Ртутные лампы были первыми источниками света, которые использовались в широкопольной флуоресцентной микроскопии. Одним из преимуществ ртутных ламп является то, что длины волн возбуждения имеют несколько пиков, совпадающих с длинами волн возбуждения многих распространенных флуорофоров, используемых в микроскопии (313, 334, 365, 405, 436, 546 и 579 нм). Однако освещение не является равномерным по всему спектру, что затрудняет количественный анализ образцов. Кроме того, инфракрасные и ближние инфракрасные флуорохромы не возбуждаются этим источником света. Наконец, ртуть - это опасный материал, которого лучше избегать, если это возможно.

      Рисунок 3 - Изображение клетки млекопитающего, полученное в широкопольном режиме с использованием Andor BC43. Изображение показывает широкопольное изображение клетки в профазе. Изображение было подвергнуто деконволюции после получения и представляет собой проекцию максимальной интенсивности 35 стеков в диапазоне 7 мкм. Синий-актин, пурпурный-митохондрии, желтый-микротрубочки, голубой-ДНК.

      Ксеноновые лампы имеют гораздо более равномерное освещение в видимом спектре по сравнению с ртутными лампами. Однако обратной стороной является меньшая интенсивность освещения, а также меньшая мощность освещения в ближнем УФ/УФ диапазоне. Это делает использование обычных красителей для окрашивания ДНК, таких как DAPI и Hoechst, затруднительным при использовании данного источника света, так как их излучение слабое. Кроме того, эти источники освещения (ртутные и ксеноновые дуговые лампы) имеют ограниченный срок службы, который уменьшается при частом включении и выключении освещения.

      Светодиодные источники света прочно заняли свое место в флуоресцентной микроскопии. Светодиоды стали высокоэффективным источником света с длительным сроком службы, на продолжительность которого не влияет включение и выключение системы. В последние годы светодиодные источники света стали популярными и постепенно вытесняют некогда распространенные ртутные и ксеноновые источники света.

      Недавно компания Andor включила в свои конфокальные системы лазерную визуализацию широкого поля. Лазерная широкопольная визуализация обеспечивает резкое и точное возбуждение освещения, что, соответственно, позволяет возбуждать флуорофоры образца. Лазерная широкопольная визуализация может обеспечить как контролируемую очень низкую интенсивность освещения, необходимую для получения изображения высокочувствительного образца, так и гораздо более высокую мощность лазера, необходимую для высокотехнологичных приложений, таких как микроскопия сверхразрешения dSTORM.

      Широкопольные микроскопы также имеют фильтры, избирательно пропускающие нужные длины волн излучения к детекторам. В широкопольной микроскопии детекторами являются камеры, как правило, EMCCD или sCMOS. На нашем сайте представлены различные научные камеры, оптимизированные для задач микроскопии.

      В целом, широкопольные системы захватывают весь свет, излучаемый образцом, и не предполагают оптического расслоения. По этой причине они не подходят для получения изображений толстых и сильно расходящихся образцов. Однако, поскольку они захватывают весь свет, излучаемый образцом, широкопольные системы полезны для:

      • Работы с образцами с высокой фоточувствительностью;
      • Визуализации быстротечных событий;
      • Тонких образцов;
      • Визуализации живых клеток.

      Для широкопольной визуализации подходят тонкие малорассеивающие образцы, такие как бактерии, дрожжи, микроводоросли и однослойные клетки. Примеры широкопольной визуализации представлены на рисунке 3.

      Решения Andor для конфокальных систем Dragonfly и BC43 обеспечивают лазерную визуализацию широкого поля.

      Andor Dragonfly предлагает все технологические возможности широкопольной визуализации. От самых простых рутинных приложений до одновременной двухцветной визуализации и даже высокотехнологичных вариантов, требующих высокой мощности лазера, таких как сверхвысокое разрешение dSTORM.

      BC43 — это рабочая лошадка для рутинных исследований и приложений, требующих менее специализированных методов микроскопии. Однако менее требовательный не значит более простой. С помощью BC43 пользователь может получить до 4 различных каналов флуоресцентной визуализации, что означает, что 4 различные структуры могут быть флуоресцентно помечены и обнаружены с помощью BC43.

      Конфокальная микроскопия

      Широкопольная флуоресцентная микроскопия имеет свои ограничения, и визуализация образцов толщиной более 30 мкм крайне затруднена при широкопольной микроскопии и практически невозможна, если образец имеет толщину более 50 мкм. Проблема в широкопольной флуоресцентной микроскопии заключается в том, что свет, генерируемый вне фокуса, улавливается детектором, и детали теряются. В таких случаях решением является использование оптического расслоения для ограничения освещения только области в фокусе. Оптическое расслоение может быть достигнуто с помощью конфокальных микроскопов.

      Конфокальные микроскопы освещают образец путем сканирования образца с помощью одного или нескольких сфокусированных световых пучков и захватывают только сфокусированный свет от оптического участка, на который поступает изображение. Существует два различных типа конфокальных микроскопов: лазерные сканирующие конфокальные микроскопы (LSCM) и конфокальные микроскопы с вращающимся диском. Обе системы конфокальной визуализации обеспечивают получение оптического среза через образец, но технология, лежащая в основе этих двух типов приборов, принципиально отличается.

      Рисунок 4. Принципиальная схема, иллюстрирующая схему освещения для микроскопии с точечным сканером и вращающимся диском. Конфокальная микроскопия с точечным сканером (a) фокусирует одну точку лазерного света через небольшое отверстие (пинхол) и последовательно сканирует образец точка за точкой. Конфокальная микроскопия с вращающимся диском (b) освещает образец с помощью вращающейся схемы из тысяч отверстий для полного одновременного конфокального освещения.

      Лазерные сканирующие конфокальные микроскопы (также называемые конфокальными микроскопами с точечным сканированием) сканируют образец с помощью небольшого пятна лазерного луча высокой интенсивности. Пятно фокусируется с помощью объектива и перемещается в боковом направлении вдоль области сканирования для сканирования образца. Из излучаемого света только сфокусированный участок Z пройдет через единственное отверстие, чтобы создать оптическое сечение (на этом единственном пятне). После прохождения через отверстие излучаемый свет регистрируется фотоумножителем (PMT). Результирующее изображение представляет собой сумму всех одиночных точек, зарегистрированных в зоне сканирования.

      Рисунок 5 - Изображение камбалы, полученное с помощью BC43 с использованием параметра конфокальной съемки. Изображение получено с помощью Andor BC 43 с использованием многократного получения и монтажа плиток. Для составления изображения было получено 6 фрагментов, охватывающих диапазон 554 мкм. Изображение обработано с помощью Imaris

      Ограничения лазерных сканирующих конфокальных микроскопов включают динамический диапазон получаемого изображения и скорость получения (поскольку образец сканируется точечно). Квантовая эффективность ФЭУ составляет 45%, что означает, что из 100 возбужденных фотонов только 45 будут преобразованы в электроны и зарегистрированы как сигнал, остальные будут потеряны. Из-за низкой скорости сканирования и низкой квантовой эффективности детекторов лазерные сканирующие конфокальные системы не подходят для визуализации живых объектов.

      Важно отметить, что из-за медленной скорости получения точечных сканеров при визуализации больших образцов приходится идти на компромисс с разрешением, что приводит к получению изображений с разрешением ниже критерия Найквиста. Более того, даже при компромиссном разрешении скорость получения изображений чрезвычайно низка по сравнению с оптимизированной многоточечной системой с вращающимся диском, такой как конфокальные системы Andor.

      Конфокальные микроскопы с вращающимся диском, также известные как многоточечные конфокальные микроскопы, сканируют образец с помощью диска, содержащего множество отверстий. Диск с отверстиями вращается с высокой скоростью, и для получения изображения требуется менее одного полного оборота диска. В результате система может передавать оптические секционированные конфокальные изображения со скоростью 44 кадра в секунду (Andor BC43) и 400 кадров в секунду (ANDOR Dragonfly).

      Системы вращающихся дисков Andor имеют встроенную двойную микролинзовую систему, в которой параллельные лучи лазерного света фокусируются через массив микролинз, а микролинзы синхронизированы с отверстиями в вращающемся диске. Эта двойная система обеспечивает более эффективный захват света, снижая фоновый шум в изображении. В результате снижается мощность лазера, необходимая для получения превосходного конфокального изображения.

      В конфокальных микроскопах с вращающимся диском используются детекторы на основе камер. Детекторы на основе камер обеспечивают квантовую эффективность, которая в 2 раза выше, чем квантовая эффективность фотоэлектронных умножителей (ФЭУ). С практической точки зрения, для получения одинакового соотношения сигнал/шум изображения в лазерном сканирующем микроскопе, образец необходимо освещать в 2 раза большей мощностью лазера по сравнению с эквивалентной системой, использующей детектор на основе камеры. Обратите внимание, что увеличение мощности лазера при освещении образца приведет к большему обесцвечиванию образца и фототоксичности.

      Хотя первое поколение конфокальных микроскопов с вращающимся диском обеспечивало оптическое разделение, оно не позволяло проводить визуализацию глубоко внутри клеток и тканей, поскольку изображения страдали от перекрестных помех от пинхоллов на глубине около 30 мкм. Однако в Andor Dragonfly и Andor BC43 оптимизированы расстояние между отверстиями и их размер, что позволяет получить систему, способную выполнять оптическое рассечение глубоко внутри клеток и тканей, вплоть до сотен нанометров и до мм в глубину.

      В целом существует два типа конфокальных систем:

      • лазерные сканирующие конфокальные микроскопы (или точечные сканеры),
      • конфокальные микроскопы с вращающимся диском (или многоточечные конфокальные микроскопы).

      И лазерные сканирующие, и вращающиеся дисковые конфокальные системы обеспечивают оптическое разделение, увеличивая соотношение сигнал/шум изображения, и позволяют визуализировать более глубокие слои клеток и тканей по сравнению с широкопольными системами.

      Тем не менее, системы с вращающимся диском обеспечивают более высокую скорость и производительность, улучшенное соотношение сигнал/шум и более мягкую визуализацию, чем конфокальные системы с точечным сканером. По этим причинам в настоящее время технология вращающихся дисков становится предпочтительной для многих исследователей.

      Деконволюция: увеличение разрешения полученного изображения

      Когда свет проходит через оптические элементы любой оптической системы (например, микроскопа), он претерпевает искажения. Любая бесконечно малая точка не будет выглядеть как одна точка, и она будет излучать свет из плоскостей выше и дальше плоскости фокусировки, что приведет к размытию изображения. Этот процесс называется сверткой (конволюцией) и присущ любой оптической системе.

      В свернутом изображении каждая точка объекта искажается. Искажение можно рассчитать с помощью математической функции PSF (Point Spread Function) (рисунок 6). Конечное изображение получается в результате применения PSF ко всем точкам объекта.

      Хотя свертка присуща любой оптической системе, по сравнению с широкопольными системами, результирующее изображение конфокальных систем гораздо в меньшей степени подвержено свертке. Тем не менее, какая бы система ни использовалась для получения изображения, на результирующем изображении всегда будет присутствовать свертка; это означает, что на результирующем изображении всегда будет присутствовать искажение, вызванное оптикой. Чем больше расфокусированного света улавливает система, тем более искаженным будет полученное изображение. Таким образом, чем больше расфокусированного света в образце, тем более размытым будет полученное изображение.

      Поскольку математика конволюции линейна, к счастью, изображение объекта может быть восстановлено, если применить обратную операцию к конволюции - этот процесс называется деконволюцией. 

      Рисунок 6 - Изображение PSF в 3D. Изображение показывает искажение изображения одной точки в оптической системе - Point Spread Function (PSF).

      Алгоритмы деконволюции работают итерационно, повышая качество изображения. Алгоритм выдает результат при достижении заранее определенного количества итераций или заранее определенного порогового увеличения качества. К сожалению, этот итерационный процесс занимает много времени и требует больших ресурсов от центрального процессора. Чем больше изображение (крупные организмы, длинный таймлапс и т.д.), тем дольше может длиться процесс обработки, от многих часов до нескольких дней (в зависимости от набора данных).

      Компания Andor внедрила ClearView-GPU в программное обеспечение для сбора и анализа изображений Fusion и Imaris. ClearView-GPU - это программное обеспечение для деконволюции на базе GPU. Деконволюция ClearView-GPU компании Andor обеспечивает результаты до 50 раз быстрее, чем методы на базе CPU, и до 10 раз быстрее, чем другие ведущие пакеты с GPU-ускорением, особенно для больших наборов данных, даже если ускорение итераций отключено.

      Кроме того, в Dragonfly и BC43 деконволюция может быть активирована как часть протокола визуализации, что ускоряет процесс и позволяет получить деконволюционное изображение после завершения съемки.

      Из вышесказанного вытекают два вопроса:

      1. Каковы преимущества использования широкопольной визуализации и деконволюции изображения?

      Важно помнить, что одним из неотъемлемых аспектов повышения соотношения сигнал/шум в конфокальном изображении является выполнение оптического секционирования путем отбрасывания расфокусированного света. Поэтому изображения, полученные с помощью конфокального микроскопа, могут требовать большего освещения, чем при использовании широкопольной системы. Это может привести к повышенному обесцвечиванию и фототоксичности. Одним из хороших вариантов для высокочувствительных образцов является получение изображений в широкопольной модальности. Полученное изображение может быть восстановлено с помощью деконволюции (Рисунок 7). Поскольку образец был не очень толстым, широкопольный режим идеально подходит для визуализации, время экспозиции, а также мощность лазера, используемая для получения изображения, могут быть значительно снижены.

      Рисунок 7 – Изображение клетки млекопитающего, полученное в широкопольном режиме с помощью Andor BC43. На изображении показано широкопольное изображение до деконволюции (слева) и после деконволюции (справа). Изображение представляет собой проекцию максимальной интенсивности 35 стеков в диапазоне 7 мкм. Темно-синий-актин, пурпурный-митохондрии, желтый-микротрубочки, голубой-ДНК. Изображение Клаудии Флориндо - Andor Technology

      2. Если при съемке с широким полем можно использовать меньше света и устранить размытие с помощью деконволюции, то почему бы всегда не использовать съемку с широким полем?

      Как было сказано выше, и конфокальная визуализация, и визуализация широкого поля дают преимущества восстановления изображения путем деконволюции. Пользователь должен выбрать наилучший способ получения изображений, а затем применить деконволюцию к полученному изображению. Хорошими примерами являются рисунки 7 и 8. На рисунке 7 изображение Z-стека клеток млекопитающих, полученное в режиме широкого поля, выиграло от деконволюции и дало отличный результат. С другой стороны, на рисунке 8 можно наблюдать толстый хвост рыбы, полученный в широкопольном режиме и затем деконволюционированный. В данном случае очевидно, что широкое поле не является идеальным способом визуализации для этого образца.

      Рисунок 8 - Изображение камбалы в широкопольном режиме с использованием BC43 и деконволюцией с помощью Clear-View GPU. 

      На рисунке 8 представлен хвост камбалы, полученный в режиме широкопольной визуализации A) и деконволюции B). Метод широкопольной визуализации не является лучшим вариантом для изображения более толстых образцов - хотя изображение выиграло от восстановления с помощью деконволюции Clear-View на базе GPU, исходная рыба была слишком толстой для получения изображения в широкопольном режиме. Результат может быть значительно улучшен, если исходное изображение получено с использованием конфокального метода. - см. рисунок 9

      Тот же участок рыбы с рисунка 8 был также исследован в конфокальном режиме и впоследствии подвергнут деконволюции - рисунок 9.

      Рисунок 9 - Изображение камбалы в конфокальном режиме с использованием BC43 и деконволюцией с помощью Clear-View GPU. 

      На рисунке 9 хвост камбалы, полученный в режиме конфокальной визуализации A) и деконволюции B). Конфокальный режим визуализации является лучшим вариантом для получения изображений более толстых образцов, качество изображения было улучшено после деконволюции с помощью Clear-View GPU деконволюции.

      Результаты, представленные на рисунках 7, 8 и 9, показывают явное преимущество деконволюции, но, как можно заметить, для более толстых образцов (>30 мкм) требуется конфокальный микроскоп с вращающимся диском для исключения расфокусированного света и получения изображения, которое лучше отображает объект.

      Важно отметить, что конфокальные микроскопы Andor: BC43 и Dragonfly могут получать изображения размером от сотен микрометров до миллиметрового диапазона, а деконволюция Clear-View Deconvolution всегда повышает соотношение сигнал/шум и разрешение полученных изображений.

      В целом, деконволюция - это процесс, в ходе которого искажения свертки в оптической системе математически корректируются. В результате устраняются размытость и затуманенность, которые были бы у исходного изображения. Деконволюция, таким образом, увеличивает SNR (отношение сигнал/шум) и разрешение изображения. Если система обеспечивает деконволюцию, то она всегда улучшает качество изображения.

      Обзор микроскопов Andor

      Компания Andor предлагает превосходные системы конфокальной визуализации, адаптированные к потребностям и приложениям различных пользователей. Запатентованные технологии Andor в разработке многоточечных конфокальных микроскопов гарантируют, что при использовании любой из систем пользователи получат преимущества:

      • запатентованное равномерное освещение (Borealis);
      • Высокочувствительное детектирование (EMCCD и sCMOS детекторы Andor);
      • Сверхбыстрая конфокальная визуализация (скорость конфокальной съемки до 400 кадров в секунду);
      • Высокое фоновое отклонение (изображение толстых образцов от 100 нм до мм).

      Andor предлагает две системы конфокальной визуализации - Dragonfly и BC43.

      BC43 — это высококачественная конфокальная система по доступной цене. Это прибор "все в одном", простой, компактный и чрезвычайно удобный для пользователя. BC43 — это рабочая лошадка для визуализации, которая идеально подходит для множества приложений в области наук о жизни и может поместиться в углу основного помещения или на лабораторном столе.

      Dragonfly — это конфокальная система высокого класса. Dragonfly — это комплексная система визуализации, подходящая для подавляющего большинства приложений в области биологических наук; от более рутинных приложений до высококлассной сверхбыстрой визуализации - Dragonfly может обеспечить все.

      Ниже приведены две таблицы, которые могут помочь вам выбрать конфокальный микроскоп, наилучшим образом отвечающий потребностям визуализации: 1) по области применения; 2) по методу визуализации.

      Обратите внимание, что в таблицах указано, для каких областей применения наиболее подходят различные продукты. Однако экспериментальные требования у всех разные, пожалуйста, обсудите с нами ваши конкретные требования.

      Выбор микроскопа по применению

      Пояснения к обозначениям

      Идеально подходит

      Подходит частично

      Не совместимо


      Область применения

      Эксперимент

      BC43

      Dragonfly 200

      Dragonfly 500

      Цитология

      Внутриклеточная структура

      Клеточный цикл - деление клетки

      Динамика микротрубочек

      Визуализация митохондрий (фиксированные)

      Визуализация митохондрий (живые)

      Цитология

      Динамика мембран (например, цитокинез)

      Внутриклеточное перемещение

      Визуализация ресничек (> 50 к/с)

      Движение везикул

      Ремоделирование хроматина

      Биология развития

      Раннее развитие эмбриона

      Формирование конечностей

      Подготовка образцов тканей

      Парафиновые срезы

      Целые организмы толщиной до 500 мкм

      Целые организмы толщиной более 500 мкм (зависит от прозрачности образца)

      Оплодотворение

      Взаимодействие патоген-хозяин (вирус, бактерии, грибок)

      Внутриклеточное перемещение

      Движение везикул

      Органоиды толщиной до 500 мкм

      Органоиды толщиной более 500 мкм (зависит от прозрачности образца)

      Исследования кровотока

      Биология рака

      Крупные срезы ткани

      Визуализация движения и деления живых клеток

      Инвазия in vitro

      Органоиды толщиной до 500 мкм

      Органоиды толщиной более 500 мкм

      Иммунология, заболевания

      Фиксированные образцы

      Большие образцы толщиной до 500 мкм

      Большие образцы толщиной больше 500 мкм

      Высокоскоростная визуализация живых клеток

      Кровоток

      Микробиология

      Внутриклеточная структура (сверхвысокое разрешение по технологии SRRF-Stream)

      Внутриклеточная структура - Молекулярные взаимодействия (сверхвысокое разрешение по технологии dSTORM)

      Динамика инфекции на поверхности клеток (с использованием технологии TIRF)

      Нейронауки

      Культура тканей (живых и фиксированных)

      Секционирование тканей (живых и фиксированных)

      Визуализация целого мозга (толщиной до 500 мкм)

      Визуализация целого мозга толщиной 500 мкм + (зависит от прозрачности образца)

      Визуализация кальция (волны до 40 кадров в секунду)

      Визуализация кальция (волны, искры > 40 кадров в секунду)

      Живой везикулярный транспорт

      Визуализация одиночных молекул в реальном времени

      Конус роста

      Локализация и рециркуляция рецепторов

      Биофизика

      Белково-белковые взаимодействия

      Динамика белковых мембран

      Транспорт одиночного белка

      Эндо- и экзоцитоз

      Сверхразрешение на основе локализации

      Расширяющая микроскопия

      Мультиплексная визуализация - транскриптомика с пространственным разрешением

      Мультиплексная визуализация - Протеомика с пространственным разрешением

      Выбор микроскопа по способу визуализации

      Метод

      Технология

      BC43

      Dragonfly 200

      Dragonfly 500

      Микроскопия в проходящем свете

      Дифференциальный фазовый контраст
      (DPC)

      ✘

      ✘

      ✘

      Фазовый контраст

      ✘

      ✔

      ✔

      Дифференциальный интерференционный контраст
      (DIC)

      ✘

      ✔

      ✔

      Широкопольная визуализация

      До 4 каналов

      ✔

      ✔

      ✔

      Больше 4 каналов

      ✘

      ✔

      ✔

      Одновременный захват с двух камер

      ✘

      ✔

      ✔

      Конфокальная визуализация

      Единичный пинхол

      ✔

      ✔

      ✔

      Два пинхола

      ✘

      ✔

      ✔

      Одновременный захват с двух камер

      ✘

      ✔

      ✔

      До 4 каналов

      ✔

      ✔

      ✔

      Больше 4 каналов

      ✘

      ✔

      ✔

      Визуализация образцов до 500 мкм

      ✔

      ✔

      ✔

      Визуализация образцов больше 500 мкм

      Может быть доступно

      ✔

      ✔

      Специализированная микроскопия

      TIRF

      ✘

      ✘

      ✔

      dSTORM

      ✘

      ✘

      ✔

      3D-STORM

      ✘

      ✘

      ✔

      Режим визуализации

      Плоская (2D)

      ✔

      ✔

      ✔

      Объёмная (3D)

      ✔

      ✔

      ✔

      Деконволюция

      ✔

      ✔

      ✔

      Пространственные тайлы

      ✔

      ✔

      ✔

      Multi-Well

      ✔

      ✔

      ✔

      Сшивание

      ✔

      ✔

      ✔

      3D-Сшивание

      ✔

      ✔

      ✔

      Детектор

      sCMOS

      ✔

      ✔

      ✔

      EMCCD

      ✘

      ✔

      ✔

      Прочее

      БИК до 780нм

      ✘

      ✔

      ✔

      Компактность

      ✔

      Температурный контроль

      ✔

      ✔

      ✔

      Многопозиционность

      ✔

      ✔

      ✔

      Тайм-лапс

      ✔

      ✔

      ✔


      • Prev
      • Next
      Товары
      • Фото Система Dragonfly для высокоскоростной конфокальной микроскопии
        Система Dragonfly для высокоскоростной конфокальной микроскопии
        Арт. Dragonfly
        В корзину В корзине
      • Изображение Компактный конфокальный микроскоп BC43
        Компактный конфокальный микроскоп BC43
        Арт. BC43
        В корзину В корзине
      • Комментарии
      Загрузка комментариев...

      Назад к списку Следующая статья
      Категории
      • Аналитическое оборудование1
      • Апгрейды для микроскопов9
      • Источники излучения1
      • Камеры для микроскопов7
      • Лабораторная посуда8
      • Микроскопия68
      • Микрофлюидика49
      • ОКТ3
      • Оптогенетика3
      • Счет фотонов8
      Это интересно
      • Разарретирование (Uncaging) клетки с использованием двухфотонного микроскопа FEMTOSmart
        Разарретирование (Uncaging) клетки с использованием двухфотонного микроскопа FEMTOSmart
        24 Марта 2023
      • Оптогенетика и фотостимуляция с помощью микроскопа FEMTOSmart
        Оптогенетика и фотостимуляция с помощью микроскопа FEMTOSmart
        20 Марта 2023
      • Трехфотонная визуализация с помощью микроскопа FEMTOSmart
        Трехфотонная визуализация с помощью микроскопа FEMTOSmart
        17 Марта 2023
      • Визуализация дендритов с помощью двухфотонного микроскопа FEMTOSmart
        Визуализация дендритов с помощью двухфотонного микроскопа FEMTOSmart
        16 Марта 2023
      • Сканирование нейронных сетей с помощью двухфотонного лазерного 2D сканирующего микроскопа FEMTOSmart
        Сканирование нейронных сетей с помощью двухфотонного лазерного 2D сканирующего микроскопа FEMTOSmart
        15 Марта 2023
      • Двухфотонный лазерный 3D сканирующий микроскоп для оптогенетики
        Двухфотонный лазерный 3D сканирующий микроскоп для оптогенетики
        13 Марта 2023
      • Изучение поведенческих характеристик с помощью двухфотонного микроскопа FEMTO3D Atlas
        Изучение поведенческих характеристик с помощью двухфотонного микроскопа FEMTO3D Atlas
        10 Марта 2023
      • Сканирование дендритов с помощью микроскопа FEMTO3D Atlas
        Сканирование дендритов с помощью микроскопа FEMTO3D Atlas
        9 Марта 2023
      • 3D визуализация нейронных сетей с помощью микроскопа FEMTO3D Atlas
        3D визуализация нейронных сетей с помощью микроскопа FEMTO3D Atlas
        1 Марта 2023
      • Живая визуализация кальция для мониторинга активации Т-клеток с использованием Inscoper liveRATIO
        Живая визуализация кальция для мониторинга активации Т-клеток с использованием Inscoper liveRATIO
        13 Февраля 2023
      • Изучение динамики органелл в живых клетках с помощью лазеров Oxxius и системы Inscoper scanFRAP
        Изучение динамики органелл в живых клетках с помощью лазеров Oxxius и системы Inscoper scanFRAP
        9 Февраля 2023
      • Модернизация и оптимизация кастомизированных систем с Inscoper Imaging Solution
        Модернизация и оптимизация кастомизированных систем с Inscoper Imaging Solution
        7 Февраля 2023
      • Сравнение MINFLUX, PALM, STED и STORM методов сверхвысокого разрешения
        Сравнение MINFLUX, PALM, STED и STORM методов сверхвысокого разрешения
        30 Декабря 2022
      • Как пончик изменил мир
        Как пончик изменил мир
        29 Декабря 2022
      • STEDYCON: простое решение для микроскопии сверхвысокого разрешения размером с обувную коробку
        STEDYCON: простое решение для микроскопии сверхвысокого разрешения размером с обувную коробку
        28 Декабря 2022
      • Как измерить разрешение? Часть 2
        Как измерить разрешение? Часть 2
        27 Декабря 2022
      • Что такое разрешение? Часть 1
        Что такое разрешение? Часть 1
        22 Декабря 2022
      • Как функция рассеяния точки (PSF) и количество фотонов влияют на разрешение
        Как функция рассеяния точки (PSF) и количество фотонов влияют на разрешение
        16 Декабря 2022
      • Микрооблучение с использованием Inscoper scanFRAP для мониторинга репарации ДНК в режиме реального времени
        Микрооблучение с использованием Inscoper scanFRAP для мониторинга репарации ДНК в режиме реального времени
        1 Апреля 2022
      • Фототермическая терапия золотыми наностержнями
        Фототермическая терапия золотыми наностержнями
        1 Апреля 2022
      Облако тегов
      dSTORM FLIM PALM STED TCSPC Thorlabs Адаптивное освещение Аксессуары Апгрейд микроскопов Визуализация живых клеток Двухцветная визуализация Кальциевая визуализация Камеры для микроскопов Комплектующие микроскопов Контроль качества флуоресцентных микроскопов Конфокальная микроскопия Лабораторная посуда Лазеры Микроскопия плоскостного освещения Микроскопия сверхвысокого разрешения Многоволновые лазеры ОКТ Оптогенетика Сверхвысокое разрешение Снижение фототоксичности Счет фотонов Флуоресцентная микроскопия флуорофоры
      Оптимальный выбор
      Оптимальный выбор Широкий ассортимент и подбор аналогов
      Привлекательные цены
      Привлекательные цены Всегда выгодные предложения
      Товар дня!
      Слайд-камера µ-Slide, 8 лунок
      Слайд-камера µ-Slide, 8 лунок
      Арт. 80826 / 80826-90 / 80821 / 80822 / 80824 / 80829
      В корзину В корзине
      Подписывайтесь на новости и акции:
      Компания
      О компании
      Сертификаты
      Поставщики
      Вакансии
      Клиенты
      Реквизиты
      Каталог
      Микроскопы
      Системы визуализации
      Модификация микроскопов
      Аксессуары для микроскопов
      Микрофлюидика
      Электрофизиология
      Исследования на животных
      Лабораторные принадлежности
      Аналитическое оборудование
      FLIM микроскопия
      Источники излучения
      Научные камеры
      Реагенты и реактивы
      Каталог Edmund Optics
      Основы микроскопии
      Конфокальная микроскопия
      Мультифотонная микроскопия
      Общие принципы
      Флуоресцентная микроскопия
      Оптогенетика
      Проекты
      Микроскопия
      Оптогенетика
      Наши контакты

      8 (800) 551-20-97
      +7 (495) 792-39-88
      +7 (812) 407-10-47
      Пн. – Пт.: с 9:30 до 18:00
      Москва, Шаболовка, 10 info@azimp-micro.ru
      info@azimp-micro.ru
      © 2023 Все права защищены.
      0

      Корзина

      Ваша корзина пуста

      Исправить это просто: выберите в каталоге интересующий товар и нажмите кнопку «В корзину»
      В каталог